目的:众所周知,我们机体细胞中的DNA在许多方面不断受到损伤,这些损伤包括DNA复制过程中引入的DNA碱基不匹配、化学物质产生的其他碱基加合物和交联、紫外线(UV)引起的碱基损伤,以及拓扑异构酶、化学反应或电离辐射(IR)产生的单链和双链DNA断裂(SSB/DSB)。为了将自己的基因组完整地传递给下一代,所有的生物体都进化出了DNA修复途径和相关的过程来应对这种损伤,在大多数情况下,它们会准确地修复基因组。同源重组(Homologous recombination,HR)是一种在所有生命形式中都存在的DNA代谢过程,它能提供高保真度、模板依赖的修复或对复杂DNA损伤(包括DNA间隙、DNA双链断裂(DSBs)和DNA链间交联(ICLs))的耐受性,在基因组稳定性方面发挥着突出的作用。已经有证据表明含有BRCT(BRCA1 C-terminal)结构域的蛋白质在DNA损伤应答(DDR)过程中发挥着重要作用。TOPBP1(DNA topoisomerase II binding protein 1)含有8个BRCT结构域,它是重要的DDR分子,可以通过HR修复DSB损伤,但其调节HR的机制尚不清楚。方法:通过免疫亲和纯化和Co-IP证实TOPBP1与转录剪接因子HTATSF1(HIV-1 Tat specific factor 1)存在物理上的相互作用。通过激光显微切割,免疫荧光染色等实验探究HTATSF1能否参与DNA损伤修复。药物处理并用激光显微切割系统切割稳定表达GFP-HTATSF1的细胞,检测HTATSF1的募集受什么途径调控。利用乳糖操纵子系统,免疫荧光染色等实验探究HTATSF1能否影响TOPBP1在DNA损伤位点的募集。药物处理并用激光显微系统切割稳定表达GFP-TOPBP1的细胞,检测TOPBP1的募集受什么途径影响。免疫荧光实验检测敲低HTATSF1对HR通路核心因子RAD51募集的影响。采用HR Reporter系统证明HTATSF1参与HR修复。通过MTS实验,检测在DNA损伤下细胞的增殖及存活。通过数据库分析HTATSF1在哪种肿瘤高表达,并在相应的癌细胞缺失HTATSF1检测细胞的生存活性。结果:1、HTATSF1与TOPBP1存在物理上的相互作用,并且是依赖于HTATSF1的C端的。2、HTATSF1可以募集到DNA损伤位点并受PARPi影响。3、敲低HTATSF1能够影响TOPBP1的募集,并且TOPBP1的募集也受PARPi的影响。4、敲低HTATSF1减弱RAD51在DSB处的募集。5、HTATSF1参与HR修复,使细胞对基因毒性的耐受性增强。6、HTATSF1在乳腺癌高表达,HTATSF1高表达乳腺癌患者预后不良。结论:HATSF1可以募集到DNA双链断裂损伤位点参与DSB损伤修复,并且HTATSF1能够影响TOPBP1的招募。HTATSF1的缺失使RAD51在DSB处的募集减弱,从而影响HR修复。缺失HTATSF1使细胞对DNA损伤的敏感性增加。并且HTATSF1在乳腺癌高表达。从我们的结果来看,HTATSF1可能赋予乳腺细胞抵抗DNA损伤的能力,这就提示我们HTATSF1所介导的异常修复能力的获得可能是发生发展过程中基因组不稳定性的驱动因素之一,为乳腺癌的治疗提供了新的靶点。