前言 据病理资料统计分析，口腔颌面部恶性肿瘤约占全身恶性肿瘤的8.2％，它们多数来源于上皮组织，尤以鳞状上皮细胞癌最为常见。 p53基因是一种抑癌基因，在人类肿瘤中p53基因常有突变，在头颈部鳞状细胞癌中(HNSCC)被研究肿瘤的40％-50％已证明与这种基因的改变有关。p53家族的新成员p63与p73基因与p53在结构上具有很高的同源性，所以它们的转录与凋亡功能与p53很相似，被认为可能是候选的肿瘤抑制基因。然而由于p63与p73基因可以形成很多蛋白异构体，在很多肿瘤中过表达及罕见的基因突变，二者也可能是一种癌基因。它们在肿瘤中的作用及与p53的关联有待进一步的探讨。 在我国舌癌占整个HNSCC的40％以上。国内外对p53、p63、p73在舌鳞癌中作用的研究报道极少。本实验拟用免疫组化S-P染色法检测41例舌鳞癌组织中p53、p63、p73的表达情形，探讨其与临床病理特性的关系，为舌癌的辅助诊断及基因治疗提供参考依据。 方法 1．材料：收集中国医科大学第一附属医院口腔颌面外科1995年—2002年舌体鳞癌及舌鳞状上皮非典型性增生存档蜡块标本44例。其中41例为舌体鳞状细胞癌，术前未行化疗及放疗，标本按性别，年龄，UICC标准肿瘤分期(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ)，肿瘤分化程度(高、中、低)及是否有淋巴结转移等进行分类。男27例，女14例，年龄范围30—68岁，平均50.59岁。Ⅰ—Ⅱ期13例，Ⅲ—Ⅳ期28例。高分化30例，中分化7例，低分化4例。区域性淋巴结转移12例。 对照组17例，其中上皮非典型性增生3例，另外14例源于舌癌癌旁正常粘膜组织经HE染色后确认。 2．实验试剂：一抗p63(4A4+63P02)鼠抗人单克隆抗体、一抗P53(DO—7)单克隆抗体、SP试剂盒、DAB显色剂，均购自福州迈新公司；一抗夕3(H一刁9)兔抗人多克隆抗体，购自北京中山公司，其稀释度1:100。 3.采用免疫组织化学S一P染色法 (l)主要步骤:蜡块标本制备4卿连续切片，脱蜡水化后，按说明书进行，必3、p73需经柠檬酸高温高压组织抗原修复(PH二6.0)。一抗户3、两3保湿盒内37“C下孵育2小时，夕3 4OC过夜。 (2)结果判定:两名病理科医师分别描绘记录结果。户3、两3阳性细胞为棕黄色，价3染色阳性细胞为棕红色，均定位于细胞核。高倍显微镜下观察10个视野计数，按阳性细胞所占比例分为:核无染色或阳性细胞数<10%为(一)，阳性细胞数10%一50%为(+)，51%一75%为(++)，>75%为(+++)。 (3)统计学分析:在SPSsl 1 .5统计软件中进行，采用XZ检验和四格表确切概率法，显著性差异P<0.05有意义。结果 1.正常舌鳞状上皮及不典型增生组织中户3、p63、夕3蛋白分布:p53蛋白未见阳性染色;两3、夕3蛋白显色较弱，低表达。P63蛋白阳性表达主要位于上皮基底层并向上到少部分棘细胞层的细胞中，在基底层较为密集，夕3蛋白阳性表达主要在基底层的细胞中，少部分细胞质同时呈弱棕红色。 2.舌鳞癌中p53、两3、夕3蛋白分布:可见肿瘤细胞阳性反应程度增加。p53蛋白染色细胞核呈棕黄色，弥漫性分布;两3、p73蛋白大多为弥散性或局灶性分布，在癌巢中染色细胞核主要分布于癌巢的外周。 3.免疫组化染色统计分析:舌癌中两3、夕3阳性表达率(分别为90.24%、65.85%)与二者在正常舌鳞状上皮及不典型增生组织中的表达率(分别为29.41%、17.64%)比较有显著性差异(P<0.05)。户3、P63、夕3的蛋白表达与舌癌患者的性别、年龄、临床分期、分化程度、颈淋巴结转移等均无关(P>0.05)。41例舌癌组织中，两3与户3表达一致者23例，P63与p73表达一致者29例，p53与夕3表达一致者19例，P53、的3、夕3蛋白表达两两间无明显相关(P>0.05)，P63在舌癌中表达的阳性率与夕3及P53相比有统计学意义(P<0.05)。结论 1.两3、价3在舌癌中有较高水平表达。 2.两3、户3在舌癌的发生发展中起着重要的作用。 3.在舌癌中户3、颐3、夕3的表达与舌鳞癌临床病理特性无关。 4.p53、两3、夕3在舌癌中的表达两两间无相关性，三者在舌癌中的作用是相互独立的。 5.两3在舌癌中起着癌基因的作用，它可以作为一种有用的舌癌检测的标志物。