混合花粉授粉茶树杂交F1代AFLP分析及优株选择

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本项目选择以国家级茶树良种槠叶齐、福鼎大白茶、白毫早、龙井43为父本,省级茶树良种湘波绿为母本,1980年取父本花粉等量混合杂交授粉所获得的F1代79个单株为实验材料,应用AFLP分子标记技术和茶树育种中常用的优株选择方法对其进行了研究,得到以下主要研究结果:1.本项研究通过AFLP分子标记技术聚类分析对其F1代各单株的父本进行了初步鉴定认为:使用AFLP分子标记方法多态性高、重复性好,使用E0/M0预扩、5对选扩引物(E41/M42,E41/M55,E42/M34,E43/M42,E44/M33)可以将混合花粉授粉茶树杂交F1代79个单株区分开来,是适用于混合花粉授粉茶树杂交后代亲子鉴定的方法。2.采用数据统计分析软件DPS2000中的UPGMA法对实验数据进行聚类分析,得到了根据遗传距离建立的聚类图。在遗传距离为0.76处取结合线,可将所有材料分为4个类组,认为父本为槠叶齐的有37个单株:8、9、11、12、13、15、16、19、21、25、27、28、30、39、40、41、43、44、47、49、50、54、55、56、57、61、65、66、67、69、70、71、72、75、77、78、79号。父本为龙井43的单株有15个:2、4、7、14、17、23、26、29、32、36、60、62、63、64、73号。父本是福鼎大白茶的有15个单株:1、3、10、18、22、24、31、38、45、46、48、59、68、74、76号。父本为白毫早的最少,有12个单株:5、6、20、33、34、35、37、42、51、52、53、58号。为混合花粉授粉茶树杂交后代进行品种比较实验时对照父本品种的确定提供了确切的依据和方法。3.AFLP聚类分析结果将混合花粉授粉茶树杂交的4个父本完全分开,其F1代79个单株分别归于4个父本所在的类群里,其中龙井43与湘波绿出现的总条带数为395条,其F1代15个单株出现与父母本相异的条带数最多的达到19条,最少的仅有5条,F1群体与父母本总的相异条带数为41条,即该组合双亲的AFLP谱带在其F1代中的总表现率为89.62%,其它组合及后代有类似表现,这既说明各单株是其亲本的真正后代,同时又表明混合花粉授粉茶树杂交F1代较单一父本杂交的分离度更大,产生新的变异类型更多。4.AFLP聚类分析结果表明,混合授粉法确实可以提高杂交的可孕性,改变亲本间的亲和力,为品种与种质创新提供了更多可能途径。根据杂交档案记载,本实验材料的结实率为28.8%,高于各父本分别杂交的结实率,证明混合授粉法可提高杂交的可孕性,相应提高选种效率。母本湘波绿与父本中的槠叶齐、白毫早都来源于安化群体,其亲缘关系近,在非混合花粉授粉时杂交亲和力是不高的,但本实验AFLP聚类分析表明,以与母本亲缘关系近的槠叶齐为父本的单株数最多,达37个,占总单株数的46.8%,显著高于亲缘关系远的龙井43和福鼎大白茶(均为19.0%),槠叶齐成为该杂交组合中的优势父本。这种变化可供今后进行混合花粉授粉杂交亲本选配时参考。5.根据已有的早期单株鉴定及遗传研究成果,对这一杂交组合选择生长势、分枝角度、营养芽物候期、成熟叶片及芽叶特征等形态特征,茶多酚、氨基酸、水浸出物含量等生化成分进行了较系统的比较分析,结合所得的AFLP分析结果进行了优株选拔,确定了14个优株进入下一步试验:2,4,6,9,11,13,18,19,29,51,62,70,73,74。这其中父本为槠叶齐的第13号单株的多项指标均优于其它单株,甚至有超双亲优势,说明槠叶齐等与湘波绿亲缘关系较近的父本通过混合花粉授粉杂交提高杂交亲和力后,有助于创造新的种质、培育更优良的茶树新品种。与母本湘波绿亲缘关系最远的龙井43的后代优株率最高(33.3%),证明亲本的亲缘关系越远,总的杂交优势越强。
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