香蕉组培愈伤组织再生体系构建的研究

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香蕉品种单一是限制香蕉产业发展的关键因素之一,选育优良香蕉新品种是当前亟待解决的问题。香蕉(Musa nana Lour)属芭蕉科(Musaceae)芭蕉属(Musa)。食用蕉多为三倍体,难以利用传统的杂交技术等进行新品种选育。利用生物技术育种有望突破这一瓶颈。建立高效、稳定的香蕉组培愈伤组织再生体系是利用生物技术开展香蕉新品种培育的前提基础,本研究的目的在于探讨利用不同香蕉外植体诱导组培愈伤及再生的可行性,并建立相关的技术方法。本研究内容包括筛选利用不同外植体诱导胚性愈伤组织试验,构建胚性细胞悬浮系(ECS)试验,诱导胚性愈伤组织再生出苗试验等。主要的研究结果如下:①诱导假茎形成胚性愈伤组织试验中:T2(MS+TDZ0.02mg/l+2,4-D7mg/1)培养基对矮蕉假茎的诱导率最高,其值为9%;T4(MS+TDZ1.0mg/1+2,4-D7mg/1)培养基对红研一号假茎的诱导率最高,其值为3%;T2培养基对桂蕉六号假茎的诱导率最高,其值为6%。②诱导矮蕉不同部位胚性愈伤组织再生试验中:最适宜用于诱导的部位为叶柄,培养基MS+TDZ0.2mg/1+2,4-D5mg/1,暗培养处理3d即处理C3最有利于矮蕉胚性愈伤组织的再生,其诱导率高达59%。③诱导花蕾胚性愈伤组织再生试验中:桂蕉六号花蕾最适宜用于诱导的部位为顶端,最适宜培养基为M1(MS+VH1mg/1+NAA1mg/1+IAA1mg/1),其诱导率为43.8%。最适宜诱导矮蕉花蕾胚性愈伤组织再生的部位为中部,最适宜培养基为M3(MS+VH lmg/1+NAA lmg/1+IAA lmg/1+TDZ2mg/l),诱导率为30.0%。最适宜诱导红研一号花蕾形成愈伤组织的部位为顶端,最适宜培养基为M1,诱导率为66.7%。④ECS建立的试验中:由矮蕉无菌苗假茎诱导产生的胚性愈伤组织较容易建立起ECS。最适宜液体培养基为ZT2(VC10mg/1+2,4-D1.1mg/1+ZT25mg/1)。⑤诱导苗再生试验中:桂蕉六号花蕾胚性愈伤组织再生出苗的分化率最高,其值为81.8%,最适培养基为Y3(MS+ZT0.05mg/.1+TDZ0.16mg/1+NAA0.2mg/1)。
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