TRPV4-SKCa复合物在老年大鼠主支气管平滑肌中的改变及其对收缩的影响

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目的在瞬时受体电位离子通道家族(transient receptor potential, TRP)中,TRPV4是香草素受体亚家族(transient receptor potential vanilloid, TRPV)的重要成员之一,在许多组织细胞中有重要生理功能。本实验通过离体气管张力和蛋白免疫印迹实验,研究和阐述了TRPV4和小电导钙激活钾通道3(small-conductance calcium-activated potassium channels, SK3)复合物在老年大鼠气管平滑肌中相互作用的改变以及对气管平滑肌收缩的影响及其机制。方法1.动物分组:根据实验总体设计,将大鼠分为年轻大鼠和老年大鼠两组;2.离体气管张力实验:2.1用高钾溶液分别激动年轻大鼠和老年大鼠气管环收缩,观察高钾溶液引起的收缩不同;2.2用卡巴胆碱分别收缩年轻大鼠和老年大鼠气管环,比较卡巴胆碱引起的收缩不同;2.3观察TRPV4通道激动剂GSK对卡巴胆碱引起的收缩影响;2.4分别观察TRPV4通道阻断剂HC06047和RN1734对GSK引起的气管舒张效应的影响;3.蛋白免疫印迹实验:检测TRPV4和SK3在年轻和老年大鼠气管平滑肌上表达量的变化。结果1.高钾溶液引起的年轻和老年大鼠气管收缩没有显著差异,但与年轻大鼠相比,卡巴胆碱引起的老年大鼠气管收缩显著增强;2.与年轻大鼠相比,老年大鼠中TRPV4激动剂GSK舒张卡巴胆碱引起的收缩反应显著降低;而两组大鼠分别用TRPV4阻断剂HC06047或RN1734预处理后,GSK舒张卡巴胆碱引起的收缩反应均被显著阻断;3.蛋白免疫印迹结果显示,老年大鼠与年轻大鼠相比,气管平滑肌组织TRPV4的表达显著升高,而SK3的表达却显著降低。结论SK3在老年大鼠气管平滑肌上的表达显著减少,而TRPV4的表达代偿性增强,TRPV4-SK3信号复合物在老年大鼠气管平滑肌上表达的改变可能与老年大鼠气管舒张效应减弱有密切关系。
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