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碳酸酐酶（Carbonic Anhydrase, CA）是一类催化CO2和HCO3-之间相互转化的含锌金属酶，与光合作用密切相关。对油菜碳酸酐酶进行基因定位，对找到控制CA酶活基因和筛选具有高CA活性的油菜、提高油菜产量具有重要意义。 本研究以甘蓝型冬油菜品种Tapidor和半冬性油菜品种Ningyou7亲本构建的TNDH群体为研究对象。在2011-2012年对TN群体5个不同时期的叶片CA酶活进行了测定，结合2008-2009年TN群体3个不同时期的CA活数据，对CA酶活进行了QTL定位和互作分析，结果表明，A9连锁群上存在不同时期重复出现的QTL。之后根据拟南芥中CA相关基因设计了82对GBM引物，筛选出28对差异引物，其中的26对引物定位在了以TN932为基础的遗传连锁图中。利用整合的连锁图，再次对CA酶活进行QTL定位，发现其中ACA1-A9b被定位在了QTL置信区间，和TN932的结果相比，不仅缩小了该QTL的区间，并且提高了加性效应和解释遗传变异的效应值。通过和白菜、甘蓝和拟南芥之间比较作图，得到了位于QTL区间内的Bra016223，Bra027010，Bol015857，Bol02257，Bra006942这五个候选基因。最后，对这5个候选基因进行了初步克隆，得到了TN亲本的Bra027010, Bra006942, Bol022577这3个基因的基因组序列，并且构建了TN亲本的Bra016223，Bra006942， Bol015857的原核表达载体。