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糖皮质激素(glucocorticoids,GCs)能通过基因组和非基因组机制调节细胞的生长、分化、凋亡和粘附等,但是作用机制还没有完全阐明。真核细胞的空间结构由细胞骨架(cytoskeleton)维持,细胞骨架在胚胎发育、伤口愈合以及肿瘤发生等生理和病理过程中发挥重要作用。多种细胞外信号,包括趋化因子、激素、生长因子等通过细胞膜受体以及细胞粘附分子(如整合素)等,激活细胞内的多条信号转导通路,导致细胞骨架重组,从而调节细胞的粘附、运动、生长和凋亡等。 我们实验室的前期工作发现,人工合成的糖皮质激素—地塞米松(dexamethasone,Dex)可以诱导人卵巢癌HO-8910细胞形态改变(由上皮样变为成纤维样),并增强细胞与细胞外基质间的粘附能力,但其作用机制却不是很清楚。本研究拟进一步探讨Dex对HO-8910细胞骨架的调节作用及其可能的分子机制。 我们首先用罗丹明-鬼笔环肽(Rhodamine-phalloidin)做细胞骨架肌动蛋白(actin)染色,共聚焦显微镜观察Dex处理不同时间对HO-8910细胞骨架的影响。结果显示,未经Dex处理的细胞骨架actin主要分布在细胞膜下,形成一个染色环,10nM Dex可诱导细胞骨架actin重组,表现为早期应力纤维的形成(2～8小时),后期(12小时)应力纤维的解聚,actin在胞浆均匀分布,并重新向膜周聚集的动态过程。 粘附斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)与粘附斑和应力纤维的形成有关。我们用磷酸化FAK的抗体,用Western blots的方法证实Dex能够快速(20min)增加磷酸化FAK的水平,表明Dex可以通过非基因组机制快速激活FAK,提示FAK的激活与Dex早期诱导HO-8910细胞骨架actin形成应力纤维密切相关。 小G蛋白Rho家族(Rho、Rac和Cdc42等)是细胞骨架调节的关键因子。