【摘 要】
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目的:明确ACE-AngⅡ-AT1轴相关信号因子血浆水平与其靶向micro RNA的关联关系。基于ACE-AngⅡ-AT1轴研究原发性高血压阴虚阳亢证、非阴虚阳亢证以及健康体检者之间靶向micro RNA的差异,探讨差异表达的micro RNA与该病阴虚阳亢证可能存在的相关性。方法:（1）在安徽省中医院和安徽省针灸医院心血管内科2022年3月-2022年10月收集门诊和住院的原发性高血压患者92例
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目的:明确ACE-AngⅡ-AT1轴相关信号因子血浆水平与其靶向micro RNA的关联关系。基于ACE-AngⅡ-AT1轴研究原发性高血压阴虚阳亢证、非阴虚阳亢证以及健康体检者之间靶向micro RNA的差异,探讨差异表达的micro RNA与该病阴虚阳亢证可能存在的相关性。方法:（1）在安徽省中医院和安徽省针灸医院心血管内科2022年3月-2022年10月收集门诊和住院的原发性高血压患者92例,其中阴虚阳亢证、肝火亢盛证、痰湿壅盛证分别24例,阴阳两虚证20例。安徽省中医院体检中心收集的正常体检者共24例。（2）空腹状态下采集静脉血5ml,存于无抗凝试管,常温下自凝后,立即37℃水浴20min,室温下离心3000r·min-1,10min后收集血浆,—30℃冻存。（3）运用靶基因在线预测软件Targetscan以及miRDB两个靶基因数据库进行在线预测miRNAs的靶基因,对两个靶基因预测软件得到的靶基因集合在DAVID数据库进行GO功能和KEGG富集分析（KEGG Pathway）,以得到miRNAs相关信号通路,最后确定ACE-AngⅡ-AT1轴靶向miRNAs。（4）用ELISA-Quantikine试剂盒测定ACE、AngⅡ、AGTR1血浆水平,操作方法按照说明书要求进行。（5）运用实时荧光定量PCR对miR-145-5p和miR-126-3p相对表达量进行荧光定量测定,其中反向引物由试剂盒提供,正向引物由上海天昊生物科技有限公司合成,每组反应设3个重复。结果:（1）使用DAVID数据库对预测的503个miR-145-5p靶基因集合进行GO功能和KEGG富集分析,获得hsa-miR-145-5p靶基因富集醛固酮的合成和分泌、PI3K-Akt信号通路、癌症的转录失调、MAPK信号通路等相关信号通路。使用DAVID数据库对预测的13个miR-126-3p靶基因集合进行GO功能和KEGG富集分析,获得miR-126-3p靶基因富集醛固酮调节的钠离子重吸收、癌症的通路等相关信号通路。（2）阴虚阳亢组、肝火亢盛组、痰湿壅盛组、阴阳两虚组miR-145-5p相对表达量分别与健康对照组间比较,P＜0.05,差异有统计学意义;肝火亢盛组、痰湿壅盛组、阴阳两虚组miR-145-5p相对表达量分别与阴虚阳亢组比较,P＜0.05,差异有统计学意义。其中,阴虚阳亢组miR-145-5p相对表达量明显低于肝火亢盛组、痰湿壅盛组、阴阳两虚组及健康对照组miR-145-5p相对表达量。miR-145-5p在高血压病阴虚阳亢证中表达水平下调。（3）miR-145-5p相对表达量与ACE、AngⅡ以及AGTR1血浆水平之间具有显著的负向相关性（P＜0.05）。结论:1)本次研究发现miR-145-5p相对表达量与ACE-AngⅡ-AT1轴相关信号因子ACE、AngⅡ和AGTR1血浆水平之间具有显著的负向相关性。2)本次研究发现miR-145-5p在原发性高血压阴虚阳亢证中表达水平下调。3)本次研究发现ACE-AngⅡ-AT1轴靶向microRNA:miR-145-5p可能是原发性高血压阴虚阳亢证形成的特异性表达miRNA。
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