研究背景近年来,随着人们的工作和生活节奏加快,竞争加剧,使严重危害人类身心健康的精神疾病如抑郁、焦虑症的患病率逐年上升,引起国际上普遍关注。焦虑症是一种精神疾病。患者易被焦虑引起的负面情绪和生理反应所困扰。有研究显示,焦虑症患者约占世界总人口的4%-6%。调查发现,我国约4.1%的人在一生中会患焦虑症,若长期不对焦虑症进行治疗,有40%-50%的患者可能会演变成抑郁症。所以,焦虑症的治疗越来越受到广大临床医务工作者的重视。治疗方面,虽然新的抗焦虑西药层出不穷,如5-轻色胺再摄取抑制剂类药物,疗效肯定,但其对认知功能、焦虑症状的改善不明显,且对消化、中枢神经、植物神经系统的不良反应也日渐受到重视。由于焦虑症是一种多因性疾病,其复发率高,缠绵难愈,需要长期治疗。西药的不良反应常常导致患者的治疗依从性差,影响临床疗效。本研究发现中药治疗与常规西药治疗焦虑症的临床疗效相当。中医学认为,肝属木主疏泄,其疏泄可调达气机,调畅情志,助运中州等。脾属土主运化,化生气血以养后天。肝主疏泄而又易失于疏泄,有疏泄不及与疏泄太过之分。疏泄不及则木不条达,气机郁滞而成“肝郁”证候,常见胸胁胀满,善太息,情志抑郁或急躁易怒,腹胀,食少,妇女月经不调等症状；疏泄太过则气逆,常见急躁易怒,失眠多梦,头胀头痛,甚至猝然昏倒等症状。中医肝脾两脏在生理上相依,土得木而达,木得土则荣,病理上相传,木郁则土壅,治疗上也常肝脾同治。肝主疏泄功能与神经-内分泌-免疫网络关系密切,脾主运化主要与消化系统关联,涉及多系统、多器官也包括神经-内分泌-免疫网络系统。肝失疏泄脾失健运与内、外环境及社会和心理因素刺激导致心理、行为和中枢神经-内分泌-免疫网络异常有密切关系。由于中医肝郁脾虚证候的症状表现和生物学基础与焦虑症的临床表现和生理病理学机制之间存在一定的相关,所以从中医肝郁脾虚证候入手研究焦虑症有一定的价值。逍遥散作为治疗肝郁脾虚证的经典方剂,同时也是中医治疗情志病的常用方,逍遥散方的药效作用涉及神经内分泌系统、消化系统、免疫系统、血液系统等,值得注意的是逍遥散能够提高应激损伤后机体的免疫力,且效果与剂量呈依赖关系。肥胖抑制素(Obestatin)是新发现的能量调节肽和摄食调节肽,由23个氨基酸残基组成,在胃、空肠、回肠、下丘脑、垂体具有高表达,其受体可能是GPR39。肥胖抑制素具有抑制摄食和降低体重,减慢胃排空速度和抑制肠道收缩,影响睡眠,调节内分泌等多种功能。肥胖抑制素和生长素来源于同一前肽原,是同一基因的不同表达产物。Ghrelin是胃激素通常与摄食行为和能量平衡。最近的研究强调,Ghrelin目标大脑调节多种功能,包括学习、记忆,动机,应激反应,焦虑和情绪。有很多论文里讨论了最近的动物和人类的研究说明生长素调节下丘脑-垂体-肾上腺轴的影响的焦虑和情绪障碍,如作为抑郁和恐惧。我们应对行动的神经网站通过调节下丘脑垂体生长素—肾上腺轴和相关的应激行为,包括中心突出的动眼神经副交感核、海马、杏仁核、蓝斑核和腹侧被盖区。压力调节行为与动机、恐惧、焦虑、抑郁和食欲有关；因此,评估潜在的作用Ghrelin作为压力反馈信号,调节这些相关的行为。最后,我们简要研究重要未来研究的重点,有助于我们更加接近潜在的Ghrelin的疗法来治疗应激反应与相关疾病。那么焦虑症胃肠的Ghrelin和Obestatin含量是否会发生改变?而且中药复方对焦虑症胃肠道Ghrelin和Obestatin的含量是否有调节作用?本研究拟于建立焦虑症大鼠模型的基础上,采用逍遥散对焦虑症模型大鼠进行治疗,并观察各组大鼠胃肠道Ghrelin和Obestatin含量的变化。实验目的：本课题拟于建立慢性束缚应激焦虑症大鼠模型的基础上,通过观察焦虑症模型大鼠行为学与胃肠道Ghrelin和Obestatin的含量,探讨Ghrelin和Obestatin含量与焦虑症之间的关系及逍遥散的调节作用,为焦虑症的诊断和治疗提供一定理论基础。实验方法：(1)将24只雄性大鼠随机分为4组,分别为：正常组、模型组,氟西汀组和逍遥散组。正常组大鼠正常饲养,其余各组大鼠每天束缚3h建立慢性束缚应激焦虑大鼠模型,造模的同时,模型组大鼠给予生理盐水灌胃,逍遥散组大鼠给予逍遥散灌胃,氟西汀组大鼠给予氟西汀灌胃,造模和治疗共14d后,模型建立成功与否通过大鼠宏观表征、体重、高架十字迷宫实验和新奇环境进食抑制实验评价。(2)将上述各组大鼠在造模14d结束时处死取材,取各组大鼠的胃底部,采用ELISA方法检测观察各组焦虑症模型大鼠胃和十二指肠Ghrelin和Obestatin的含量变化及逍遥散的调节作用。结果：(1)各组大鼠体重比较显示：造模第7d,模型组大鼠体重低于正常组,经统计学分析有显著性差异(P<0.01),而氟西汀组和逍遥散组大鼠体重高于模型组,经统计学分析有差异或显著性差异(P<0.05,P<0.01)。造模第14d,氟西汀组大鼠体重高于模型组,经统计学分析有差异(P<0.05)。(2)各组大鼠行为学比较显示：①造模第14d,模型组大鼠双侧开放臂进入次数少于正常组,经统计学分析有显著性差异(P<0.01),而氟西汀组和逍遥散组大鼠双侧开放臂进入次数多于模型组,经统计学分析有差异或显著性差异(P<0.05,P<0.01)。②造模第14d,模型组大鼠双侧开放臂停留时间短于正常组,经统计学分析有差异(P<0.05),而氟西汀组和逍遥散组大鼠双侧开放臂停留时间长于模型组,经统计学分析有差异(P<0.05)。③造模第14d,模型组大鼠运动总距离短于正常组,经统计学分析有显著性差异(P<0.01)。(3)①各组大鼠胃部Ghrelin含量比较：与正常比较模型组大鼠胃部Ghrelin含量显著降低(P<0.01),而逍遥散组和氟西汀组Ghrelin含量与正常组比较有差异(P<0.05)；与模型组比较,逍遥散组大鼠Ghrelin含量显著升高(P<0.01),而氟西汀组大鼠Ghrelin含量则无显著差异(P>0.05);与逍遥散组比较,氟西汀组大鼠胃Ghrelin的含量显著降高。②各组大鼠胃部Obestatin含量比较：模型组大鼠胃Obestatin含量高于正常组,经统计学分析有差异(P<0.05),而逍遥散组大鼠胃Obestatin含量低于模型组,经统计学分析均有显著性差异(P<0.05)。氟西汀组低于模型组,但没有统计上差异。③各组大鼠十二指肠Obestatin含量比较：模型组大鼠肠Obestatin含量高于正常组,经统计学分析有差异(P<0.05),而逍遥散组低于模型组,但没有统计上差异。氟西汀组大鼠肠Obestatin含量低于模型组,经统计学分析均有显著性差异(P<0.01)。结论：(1)以慢性束缚应激方法14d可成功建立大鼠焦虑症模型。(2)逍遥散和氟西汀均可改善焦虑症大鼠胃肠道Ghrelin和Obestatin的含量。