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肿瘤干细胞(cancer stem cell，CSC)是一群处于静息或休眠状态、具有高度自我更新和分化成子代肿瘤细胞的能力，并且能够抵抗化疗药杀伤的肿瘤细胞。肿瘤干细胞具有正常组织干细胞的干性特征，同时具有很强的成瘤能力。肿瘤干细胞理论能很好的解释肿瘤的异质性，目前多种实体瘤包括肝癌中都发现有肿瘤干细胞的存在。 骨桥蛋白(osteopontin，OPN)是一种重要的炎症因子与癌基因，在多种肿瘤包括肝细胞肝癌中高表达。我们前期的结果发现OPN可以通过抑制凋亡来促进肿瘤生长和转移。但是OPN对肿瘤细胞的干性调控作用尚没有文献报道。 侧群细胞(side population，SP)被认为是肿瘤干细胞样的一群细胞。我们首先检测了四株肝癌细胞系SP的比例以及OPN的表达情况，发现SP比例与OPN表达水平呈正相关;同时在分选的SP细胞群中，也发现OPN在SP细胞群中高表达，而在主群细胞(major population，MP)中低表达。静息细胞或称休眠细胞(quiescent cell)是一群正常情况下处于静息状态但在适当的情况下能够迅速分化增殖的一类细胞，被认为是一群潜在的干细胞。除此之外，悬浮培养的细胞球以及对化疗药抵抗的细胞都被认为是一群富集了干性的细胞群。通过免疫荧光、Real Time PCR以及Western Blot检测我们发现OPN在PKH26以及BrdU标记静息细胞中，在细胞球中以及在化疗药抵抗的细胞中都高表达。肝癌细胞系中干扰OPN的表达在体外能够减少细胞球的形成，降低SP细胞比例，增加肝癌细胞对化疗药的敏感性以及减少干性相关基因的表达，而在体内能使免疫缺陷小鼠有限稀释成瘤率明显减少。相反的，在OPN低表达的细胞系中正转OPN能增加干性特性如促进细胞球的产生等。细胞外的OPN对肝癌细胞系的干性维持起着重要作用，抗OPN抗体的加入能明显抑制细胞球的形成和SP群细胞比例。在作用机制上，OPN与细胞表面的integrinαvβ3结合，激活转录因子NF-κB，促进NF-κB与HIF1α的启动子区结合并激活HIF1α的转录，最后通过HIF1α本身或是下游基因Bmi1完成对肿瘤干性的调控。我们检测并统计了125例肝癌组织的OPN表达，发现OPN表达的高低与肝癌病人的预后呈明显负相关，而且OPN与HIF1α有明显的表达相关性，进一步证实了OPN通过HIF1α调节肿瘤细胞的干性特征。 结论:OPN在肿瘤干细胞样细胞群中高表达，通过阻断OPN的表达能够减少肿瘤细胞的干性特征以及致瘤性，阻止肿瘤生长。在机制上，OPN通过integrinαvβ3激活转录因子NF-κB，并从转录水平促进HIF1α的表达，最后通过HIF1α本身或是下游基因Bmi1完成对肿瘤细胞干性的调控。