利用纤维素酶水解纤维素生产燃料乙醇是一种有前景的技术,但是该技术需要内切葡聚糖酶、纤维二糖水解酶和β-葡萄糖苷酶协同作用,才能起到较好的水解效果。然而产纤维素酶活性较高的微生物β-葡萄糖苷酶活性低,含量少,成为纤维素酶降解纤维素的瓶颈。本研究将来源于绿色木霉（Trichoderma viride）AS3.3711、黑曲霉（Aspergillus niger）CICC 40179、斜卧青霉（Penicillium decumbens） CICC 40361的β-葡萄糖苷酶基因（bgll）分别整合到工业酿酒酵母基因组上,构建了三株能分泌表达β-葡萄糖苷酶（BGLⅠ）的酿酒酵母菌株：AS-pScIKP-Vbgll、AS-pScIKP-Nbgll、AS-pScIKP-Dbgll。首先提取绿色木霉AS3.3711、黑曲霉CICC 40179、斜卧青霉CICC 40361的总RNA,通过反转录PCR （Reverse transcription-PCR, RT-PCR）得到cDNA,以此为模板扩增获得绿色木霉bgll （Vbgll）、黑曲霉bgll （Nbgll）、斜卧青霉bgl1（Dbgl1）的编码序列（CDS）,三个基因片段分别长2235 bp、2583 bp、2586 bp。将它们分别连接到pGEM-T Easy Vector上,进行测序。序列比对发现来自绿色木霉和斜卧青霉的bgl1基因为新序列,因此向GenBank提交了Vbgll的CDS（注册号为FJ882071）和Dbgll的CDS（注册号为GU320212）。然后将测序正确的三个基因分别接入载体pScIKP,构建得到表达载体pScIKP-Vbgll、pScIKP-Nbgll和pScIKP-Dbgll;通过电转化方法将线性化的重组载体整合到工业酿酒酵母菌株AS2.489中,在含有G418抗性的平板上筛选重组子；用水杨素的方法对重组子酶活进行了筛选,得到AS-pScIKP-Vbgll、AS-pScIKP-Nbgll、AS-pScIKP-Dbgll重组菌株。表达结果发现,Vbgl1和Nbgl1能利用自身的信号肽在酿酒酵母中分泌表达,但是Dbgll转化株的酶活很弱。对每种重组菌的酶活和OD600分别进行检测发现,AS-pScIKP-Vbgll重组菌OD600和酶活最大值都出现在84 h,最大酶活0.978 U／ml；重组酶VBGLⅠ的最适温度为60℃,最适pH为4.5,在pH4.0和5.0之间酶活性变化很小比较稳定。AS-pScIKP-Nbgll重组菌的OD600出现在72 h,但产酶高峰出现在84 h,最大酶活0.849 U／ml；重组酶NBGLⅠ的最适温度为60℃,最适pH为4.5,但是受pH的影响比较大。AS-pScIKP-Dbgll的酶活较低,84 h pNPG酶活为0.020 U／ml,因此没有进一步研究。对培养84 h的三种重组酶蛋白进行酶活比较实验发现,AS-pScIKP-Vbgll产生的酶比活力最大,为1.031 U／mg；该重组菌生长快速,酶活跟菌体的生长密切相关,是三种BGLⅠ酶中最适合在酿酒酵母中表达的,具有进一步应用研究的价值。