花脸香蘑田间栽培、营养评价及液体发酵特性研究

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花脸香蘑是一种珍稀食用与药用价值的真菌,目前对花脸香蘑的研究甚少,仅对其野生资源进行了调查,初步研究花脸香蘑的生物学习性以及驯化栽培,但关于田间栽培、营养评价、液体发酵特性及酯酶同工酶尚未报道。本文对野生与驯化的花脸香蘑形态进行了比较,研究了田间栽培、营养评价、菌丝体发酵特性及酯酶同工酶在菌种鉴定中的应用,为进一步研究、开发花脸香蘑提供科学依据。研究结果如下:1、从形态学的角度比较了野生与驯化花脸香蘑的菌盖直径、菌盖厚度、菌柄长、菌柄宽,结果表明:驯化花脸香蘑比野生花脸香蘑粗壮,均达到显著水平。在分离菌种试验中,24℃下,花脸香蘑菌丝体在CPDA培养基中生长势旺盛,平均生长速度0.28cm/d。2、适用于花脸香蘑原种培养基配方:木屑78%、白砂糖3%、玉米粉10%、豆饼粉5%、轻质CaCO32%、石灰1%、KH2PO40.5%、石膏0.5%。施基肥钙镁磷肥250g/m2、尿素50g/m2、KH2PO420g/m2,能明显增加花脸香蘑产量,生物学效率达到14%。3、花脸香蘑子实体、菌丝体18种氨基酸的含量分别为25.70%、26.00%,粗蛋白含量分别为33.0%、34.41%。氨基酸评分分别为:缬氨酸:60.0,蛋氨酸Met+胱氨酸Cys含硫氨基酸:54.3;化学评分分别为:缬氨酸:70.7,胱氨酸:30.5。花脸香蘑子实体富含各种矿质元素,Ca、Cu含量分别高达:1834mg/kg、109mg/kg,含有锌、硒、锗等人体必需的微量元素,如: Zn:107、Se:0.28、Ge:0.26。而有害元素Pb、Hg、As均达到国家食用菌卫生标准,符合食用要求。海藻糖最佳提取条件为提取温度:100℃、水的体积:100mL、时间:60min。花脸香蘑子实体海藻糖含量为8.34%,高于其他常见食用菌;多糖含量为10.31%。水分为91.58%;脂肪含量为3.15%。4、在单因素液体发酵试验中:湿生物量的最佳碳源为土豆粉和葡萄糖,干生物量的碳源为土豆粉;氮源为NH4Cl;最适pH=7;微量元素为FeSO4;菌龄为8d~12d。正交试验优化出培养湿生物量的培养基为:葡萄糖2g/100ml, NH4Cl 0.4g/100mL,pH=7,微量元素FeSO4 1.5×10-4g/100mL,菌龄8d。优化干生物量培养基配方为:土豆粉2g/100mL,NH4Cl0.4g/100mL,pH=7,FeSO41.5×10-4g/100mL,菌龄8d。采用GC-MS联用技术,主要次生代谢产物为5-氯-2-甲氧基苯甲酸甲酯、2,6-二氯苯硫氰、正癸醇、2-氯-4,5-二甲氧基苯甲醛、对硝基苯甲醇、香叶酸、丁基辛基邻苯二甲酸酯、环异亮氨酰苯脯氨酰胺、环异亮氨酰苯乙氨酰胺。5、七种不同的提取液提取同花脸香蘑同种样品的酯酶同工酶时,酶带保持一致,但提取效果不同,用pH=8.0,0.1M Tris-HCl缓冲液提取时效果较好。液体菌丝体,试管种,驯化花脸香蘑菌盖酶带有五条;野生花脸香蘑菌盖和菌柄只有三条,选用酯酶同工酶作为液体菌种鉴定,必须注意培养基、培养条件、取材部位应保持一致。
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