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背景:临床上烧(烫)伤以中小面积、Ⅱ度为绝大多数。Ⅱ度烧(烫)伤创面的转归,与早期创面局部微循环和后期创面微血管生成密切相关。早期创面的深度处于动态变化过程之中,因为局部缺血缺氧和过度炎症反应,一般创面都会逐渐加深。烧(烫)伤后引起氧化应激,过量的氧自由基致使创面修复细胞的迁移、增殖能力下降,细胞外基质合成障碍,并通过破坏角化的上皮细胞和管腔的渗透性以及胶原的代谢阻碍创面愈合进程。因此,有针对性的寻求通过对抗深Ⅱ度烧(烫)伤创面氧化应激反应、改善创面局部微循环、减轻过度炎症反应,以促进烧(烫)伤创面愈合的药物,将为烧(烫)伤创面提供新的治疗手段和护理思路。锌-金属硫蛋白(Zn-metallothionein, Zn-MT)系一种低分子量含多巯基与二价金属、鳌合7个锌离子的非酶蛋白,一系列研究表明,Zn-MT具有较强的清除氧自由基,抗脂质过氧化的作用,而且在创面愈合过程中发现其可与一些细胞因子相互作用共同调节伤口愈合过程。但目前国内外的研究仅涉及Zn-MT对实验动物烫伤创面下组织耗氧量、琥珀酸脱氢酶活性的影响,对Zn-MT是否可以抑制烧(烫)伤创面氧化应激反应、改善创面微循环,防止血栓形成,并阻止早期烧(烫)伤创面向深部发展,促进并加快创面愈合尚无研究。目的:本研究通过建立深Ⅱ度烫伤大鼠模型,观察Zn-MT对深Ⅱ度烫伤创面氧化应激反应的抑制作用,并观察其对创面微循环的影响,探讨Zn-MT在深Ⅱ度烧(烫)伤创面愈合中的作用,从抑制氧化应激反应的角度探讨其促进创面愈合的可能作用机制,为烧(烫)伤创面治疗提供新的策略和护理思路。材料和方法:1.将健康雄性Wistar大鼠78只随机分为实验组(Zn-MT组)、对照组(生理盐水组)和正常对照组,实验组和对照组各36只,正常对照组6只。实验组和对照组均建立深Ⅱ度烫伤大鼠模型,伤后即刻给药,二组分别外敷单层纱布浸润的浓度为1×10-5mol/L的Zn-MT以及等渗盐水,第一天每4h换药1次,第2天和第3天每8h换药1次,此后每日换药1次,直至创面愈合。2.分别在伤后12h、24h、48h及7d、14d、21d,6个时相点观察创面愈合面积、创面愈合率,苏木精-伊红染色观察创面愈合情况,免疫组织化学染色计算创面微血管密度(microvessel density, MVD)以及血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)含量,黄嘌呤氧化还原酶法测定创面组织超氧化物歧化酶(superoxide diamutase, SOD)活性,硫代巴比妥酸法测定创面组织丙二醛(malonaldehyde, MDA)含量,氯胺T法测定创面组织羟脯氨酸(hydroxyproline, HYP)含量及免疫染色法测定创面组织Ⅰ型和Ⅲ胶原含量。结果:1.各组大鼠创面愈合面积百分比:实验组和对照组两组的创面愈合率随时间推移均表现出上升趋势,在伤后7d,14d,18d,21d实验组的创面愈合率均显著高于对照组(P<0.05)。2.在伤后7d、14d、21d三个时相点,两组的创面MVD随时间推移均表现出上升趋势,相对三个时相点而言均有非常显著的升高(P<0.01),而且实验组显著高于对照组(P<0.01)。3.在伤后12h,实验组和对照组两组的创面VEGF含量与正常对照组相比未显示出显著差异(P>0.05)。在伤后24h、48h、7d、14d两组含量均逐渐增加,除对照组在24h时与正常对照组相比没有显著差异外(P>0.05),其余均显示显著升高(P<0.01),实验组在上述四个时相点均显著高于对照组(P<0.01)。在伤后21d,实验组与对照组均有所下降,但与正常对照组相比仍存在显著差异(P<0.01),且两组间存在显著差异(P<0.05)。4.在伤后12h、24h、48h、7d、14d,实验组和对照组两组的创面组织SOD活性均较正常对照组显示出显著降低(P<0.01),且两组之间也存在显著差异(P<0.05)。在伤后21d,对照组活性与正常对照组相比仍存在显著差异(P<0.01),而实验组与其相比已无显著差异(P>0.05)。从均值来看,两组随着时间的推移均呈现上升趋势,对照组上升趋势较缓,实验组上升较快。5.在伤后12h,实验组和对照组两组的创面组织MDA含量与正常对照组相比没有统计学意义(P>0.05)。在伤后24h、48h,两组与正常对照组相比均明显升高(P<0.01),但实验组升高程度小于对照组(P<0.05)。在伤后7 d,两组均降低,但实验组降低程度明显大于对照组(P<0.05),且对照组与正常对照组相比有显著差异(P<0.05)。在伤后14d、21d,两组均下降,与正常对照组相比没有显著性差异(P>0.05)。6.在伤后48h、7d,实验组和对照组的创面组织HYP含量均显著升高,与正常对照组相比有显著性差异(P<0.01),且实验组均显著高于对照组(P<0.01)。在伤后14d,实验组仍显著高于对照组(P<0.01),但与正常对照组相比无显著性差异(P>0.05)。在伤后21d,实验组显著高于正常对照组(P<0.05),而对照组与正常对照组相比无显著性差异(P>0.05)。7.实验组Ⅰ、Ⅲ型胶原在伤后不同时间其免疫组化染色灰度百分比均高于对照组(P<0.01),其中I型胶原变化特点为随伤后时间表达量逐渐升高,而Ⅲ型胶原在伤后早期即有明显的合成,随着伤口逐渐愈合,其表达量逐渐下降。结论:1.锌-金属硫蛋白能明显缩短创面上皮化的时间,通过改善毛细血管血运,有效地改善烧(烫)伤创面微循环,并促进创面微血管的形成,从而加快创面愈合。2.锌-金属硫蛋白可增加大鼠深Ⅱ度烫伤创面组织血管内皮因子的合成和释放,从而通过调节血管内皮细胞增殖、迁移、增加微血管的通透性促进创面愈合。3.锌-金属硫蛋白可通过减少创面对超氧化物歧化酶的消耗,减少丙二醛的产生来抑制脂质过氧化反应,保护膜脂质与膜蛋白,其能够清除脂质过氧化物代谢物和自由基是抑制氧化应激反应的机制之一。4.锌-金属硫蛋白可以释放锌离子予创面,通过金属硫蛋白对锌的代谢调控达到创面补锌的目的是锌-金属硫蛋白促进深Ⅱ度烫伤创面愈合的机制之一。5.锌-金属硫蛋白可以明显促进胶原的合成和代谢,使增殖期胶原合成增加,为后期角质形成细胞的大量增殖并向创面的迁移覆盖提供支架,从而加速伤口的上皮化速率,促进伤口创面的成熟。