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卷烟烟气是一种复杂的氧化性气溶胶，当其暴露机体时会影响相关靶组织的氧化还原平衡，诱发氧化应激以及炎症反应，并最终导致相关疾病的发生。因此研究卷烟烟气氧化应激对评价卷烟烟气的危害性具有重要意义。本研究分别在卷烟烟气总粒相物(TPM)染毒和全烟气暴露两种实验条件下，研究了卷烟烟气TPM和全烟气诱导的细胞氧化应激作用，建立了卷烟烟气TPM和全烟气诱导的细胞氧化应激测定方法。主要研究内容如下： （1）卷烟烟气TPM诱导细胞氧化应激测定方法的建立。 a.卷烟烟气TPM染毒剂量的优化：选用3R4F参比卷烟TPM染毒支气管上皮细胞BEAS-2B和肺腺癌细胞A549，通过中性红细胞毒性实验(NRU)分别筛选出了两种细胞存活率在70％以上的 TPM染毒剂量（BEAS-2B细胞，20和40μg/mL;A549细胞,75和100μg/mL）作为后续氧化应激指标检测的TPM染毒剂量。 b.卷烟烟气TPM染毒时间的优化：选用3R4F参比卷烟TPM以75和100μg/mL染毒A549细胞，分别检测染毒4和24 h后细胞内氧化应激指标（谷胱甘肽还原态/氧化态（GSH/GSSG）、丙二醛（MDA）、4-羟基壬稀醛（HNE）、细胞外超氧化物歧化酶（EC-SOD）和8-羟基脱氧鸟苷（8-OHdG））浓度的变化。结果显示在该条件下TPM染毒24 h适宜检测细胞的氧化应激。 c.卷烟烟气TPM诱导BEAS-2B细胞和A549细胞的氧化应激：选用3R4F参比卷烟TPM分别以20和40μg/mL，75和100μg/mL染毒BEAS-2B细胞和A549细胞，经过24 h染毒后分别对两种细胞内氧化应激指标（GSH/GSSG、MDA、HNE、EC-SOD和8-OHdG）进行检测。结果显示实验组细胞内，GSH/GSSG显著降低，脂质过氧化产物MDA和HNE分别显著增加，抗氧化酶EC-SOD显著增加，DNA氧化产物8-OHdG显著性增加，表明TPM诱导了细胞氧化应激。此外BEAS-2B细胞相对于 A549细胞对 TPM诱导的氧化应激指标 GSH/GSSG、MDA、HNE、EC-SOD和8-OHdG浓度的变化较为敏感。 d.外源性抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸（NAC）对TPM诱导细胞氧化应激的影响：选用A549细胞，经抗氧化剂NAC(1 mM,2 h)预处理后以75和100μg/mL3R4F参比卷烟TPM染毒24 h，检测细胞氧化应激指标。结果证实：TPM确实诱导了细胞的氧化应激，且NAC对TPM诱导的氧化应激具有一定的保护作用。 e.比较不同卷烟样品TPM诱导细胞的氧化应激：选用5种不同卷烟TPM样品以100μg/mL染毒A549细胞，24 h后检测氧化应激指标，结果显示：不同卷烟烟气TPM样品诱导细胞产生了不同程度的氧化损伤，且GSH/GSSG、MDA、EC-SOD和8-OHdG的检测结果较明显的表现出不同样品间的差异，且EC-SOD和8-OHdG的检测结果趋势较为一致。 （2）全烟气诱导细胞氧化应激测定方法的建立。 a.全烟气染毒剂量的优化：选用BEAS-2B细胞和A549细胞，分别以优化的细胞接种密度（BEAS-2B，1.0×105；A549，4.0×104个/Transwell）接种于12孔板24 h后，进行全烟气暴露细胞，以洁净空气的暴露作为阴性对照组。经过三种细胞毒性检测试验（NRU、噻唑蓝细胞毒性实验（MTT）和乳酸脱氢酶细胞毒性试验（LDH）），分别筛选出两种细胞存活率在70%以上的烟气暴露剂量（BEAS-2B细胞，0.12%和0.27%;A549细胞,0.23%和0.67%）作为后续氧化应激指标检测的全烟气暴露剂量。 b.全烟气诱导BEAS-2B细胞和A549细胞的氧化应激：选用3R4F参比卷烟，在优化的细胞暴露条件下，分别对BEAS-2B细胞和A549细胞进行全烟气暴露，并通过检测 GSH/GSSG、MDA、HNE、EC-SOD、8-OHdG、IL-8和 IL-6的变化，研究全烟气诱导的细胞氧化应激。结果显示：全烟气暴露后细胞内GSH/GSSG显著降低，脂质过氧化产物MDA和HNE分别显著增加，抗氧化酶EC-SOD显著增加，DNA氧化产物8-OHdG显著性增加，表明全烟气诱导了细胞的氧化应激。此外, BEAS-2B细胞对全烟气诱导的氧化应激指标GSH/GSSG, MDA, HNE和8-OHdG浓度的变化较为敏感，A549细胞对全烟气诱导的EC-SOD浓度的变化较为敏感。全烟气增加了BEAS-2B细胞内IL-8和 IL-6的表达，而全烟气暴露A549细胞后，没有增加IL-8和IL-6的表达。