目的:采用UHPLC-Q-TOF-MS/MS技术鉴定半齿泽兰素和圣草次苷的体内外代谢产物,并建立LC-MS/MS法用于半齿泽兰素和圣草次苷的药动学研究。方法:采用Poroshell 120 EC-C₁₈色谱柱（2.1×100 mm,2.7μm）,应用全扫描、负离子模式监测结合多重质量亏损过滤（MMDF）和动态背景扣除（DBS）在线采集数据,监测所有可能的代谢物;并运用多种数据处理技术对代谢产物进行分析和鉴定。采用Wonda Cract ODS-2 C₁₈色谱柱（150×4.6 mm,5μm）,在多反应监测（MRM）模式下,运用QTRAP-3200系统分别对待测成分和内标进行监测。结果:本研究共鉴定出半齿泽兰素71种代谢物。其中,体内51种代谢物（血浆中8种、胆汁中5种、尿液中36种和粪便中32种）;体外60种代谢物（肝微粒体中22种和肠道菌群中53种）。氧化、氢化、乙酰化、甲基化和硫酸盐结合反应为半齿泽兰素主要的代谢途径。圣草次苷共有41种代谢物被鉴定。其中,体内32种代谢物（血浆中6种、胆汁中14种、尿液中19种和粪便中13种）;体外27种代谢物（肝微粒体中12种和肠道菌群中20种）。圣草次苷主要的代谢途径为葡萄糖基团的丢失、氧化、甲基化、氢化、乙酰化和硫酸盐结合反应。药动学研究表明,血浆中半齿泽兰素线性关系良好,精密度高、准确度好。大鼠口服半齿泽兰素后,在体内较快地被吸收,达峰浓度为974.886±293.898μg/L,而相应的达峰时间为0.25 h,且血浆平均浓度出现双峰现象。实验研究表明,大鼠口服圣草次苷后迅速吸收,达峰浓度为299.833±16.743μg/L,达峰时间为0.094±0.019 h,也产生双峰现象。结论:本研究首次采用UHPLC-Q-TOF-MS/MS结合多种高效的数据处理技术,分别对半齿泽兰素和圣草次苷的体内外代谢产物进行了鉴定。为半齿泽兰素和圣草次苷药理机制的深入研究和新药的开发提供了依据,为临床检验和应用奠定了理论基础。此外,分别建立并验证了用于大鼠血浆中半齿泽兰素和圣草次苷快速、灵敏定量的LC-MS/MS分析方法,并成功地应用于药动学研究。药动学结果表明,半齿泽兰素和圣草次苷均快速地达到最大浓度,并具有二次吸收。研究结果为进一步开展半齿泽兰素和圣草次苷的临床前和临床研究奠定了基础。