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本文以罗非鱼加工下脚料——罗非鱼排为原料,将鱼排上的碎肉与鱼骨分离,分别研究了鱼排碎肉和鱼骨的高值化利用技术。本实验利用乳酸菌发酵法提取鱼骨中活性钙;利用蛋白酶水解罗非鱼排上的碎肉,制得的水解液再脱除芳香族氨基酸制备高F值寡肽,并用秀丽隐杆线虫模型评价高F值寡肽对秀丽隐杆线虫寿命、移动力、生殖能力等的影响。具体研究内容和研究结果如下:1、以罗非鱼骨为原料,采用乳酸菌发酵法提取鱼骨中的活性钙,确定提取活性钙的最佳条件。结果表明:选用嗜酸乳杆菌CICC6074,葡萄糖5 g,蛋白胨0.5 g,接菌量为3 mL/100mL,罗非鱼骨粉2 g,水100 mL,温度37℃,发酵时间48 h,鱼骨粉的钙溶出率可达40%,发酵液中氨基态氮含量可达1.3 g/100mL。2、以罗非鱼碎肉为原料,采用蛋白酶水解法制备高F值寡肽。通过单因素筛选及正交试验设计确定最佳水解条件,水解液再经活性炭吸附脱除芳香族氨基酸。结果表明:碱性蛋白酶为最适水解用酶,其最佳水解条件为加酶量1200 U/g底物,料水比1:15,水解时间4.5 h,pH 8.0,温度50℃,在此条件下水解后蛋白质的回收率为74.5%,水解液经活性炭吸附后F值为23.1。对活性炭吸附脱除芳香族氨基酸的条件进行优化后,确定吸附条件为用炭量1:15(活性炭质量:水解液体积),时间0.5 h,pH 6.0,温度室温,经优化脱除芳香族氨基酸后的水解液的F值为29.3,活性炭吸附后的蛋白质回收率为31.2%。3、上述蛋白酶水解液,通过上大孔吸附树脂柱,再用不同浓度的乙醇进行梯度洗脱,从而达到对水解液分级分离的目的。结果表明:用60%乙醇以1.5 mL/min进行洗脱获得的组分其F值最大为19.3,多肽回收率为23.2%,其F值未能达到高F值寡肽的要求。但是将大孔吸附树脂与活性炭吸附脱除芳香族氨基酸两种方法结合,即将60%乙醇以1.5 m L/min进行洗脱获得的组分再经过活性炭吸附处理,得到F值达31,可显著提高F值,满足高F值寡肽的要求。4、水解液通过活性炭吸附和大孔吸附树脂与活性炭吸附结合两种方法得到的两个高F值寡肽组分,F值分别为22和31(以下简称样1和样2)。采用体外抗氧化活性评价法对高F值寡肽的抗氧化活性进行评价,并探究F值的大小与抗氧化活性间的关系。结果表明:体外抗氧化活性评价样1和样2的羟自由基清除率分别为86.9%、87.2%,没有明显差异,初步说明样1和样2具有抗氧化活性,但与F值的大小并没有直接的关系。5、研究了样1和样2对秀丽隐杆线虫的寿命、产卵量、移动力和吞咽频率的影响。结果表明样1和样2组线虫的产卵量,吞咽频率和移动力显著高于空白组(P<0.05),与阳性对照组Leu组无显著差异(P>0.05)。样1和样2组之间也没有显著性差异(P>0.05)。故高F值寡肽可增加线虫的寿命、产卵量、移动力和吞咽频率,但与F值的大小没有直接关系。