【摘 要】
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目的:探究膀胱上皮紧密连接蛋白ZO-1在LPS(脂多糖)诱导性膀胱炎中的改变及其意义。方法:将30只健康的雌性SD大鼠随机分为LPS组,PBS(磷酸盐缓冲液)组和对照组,LPS组每48小时予以LPS溶液(500μg/500μl)灌注膀胱;PBS组予以相同时间等量PBS溶液(500μl)灌注膀胱;对照组不做任何处理,正常饲养。4周后处死大鼠取膀胱组织,对大鼠膀胱标本进行HE染色评估膀胱炎症及上皮形态
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目的:探究膀胱上皮紧密连接蛋白ZO-1在LPS(脂多糖)诱导性膀胱炎中的改变及其意义。方法:将30只健康的雌性SD大鼠随机分为LPS组,PBS(磷酸盐缓冲液)组和对照组,LPS组每48小时予以LPS溶液(500μg/500μl)灌注膀胱;PBS组予以相同时间等量PBS溶液(500μl)灌注膀胱;对照组不做任何处理,正常饲养。4周后处死大鼠取膀胱组织,对大鼠膀胱标本进行HE染色评估膀胱炎症及上皮形态改变情况,再通过免疫组织化学染色分析膀胱上皮ZO-1蛋白的含量表达。使用含4ug/ml LPS的培养基对人膀胱上皮永生化细胞(SV-HUC-1)进行诱导,实验组细胞分别使用屏障保护剂Y-27632与bnz-c AMP进行预处理,48小时后固定细胞和提取细胞总蛋白,进行Western Blot实验,检测膀胱上皮细胞中紧密连接蛋白ZO-1的表达情况,同时,通过细胞免疫荧光,检测膀胱上皮细胞ZO-1蛋白的分布。结果:动物实验中,HE染色提示LPS组大鼠膀胱组织对比对照组、PBS组上皮细胞出现增生、糜烂,黏膜下层可见较多炎症细胞浸润,免疫组化提示LPS组大鼠对比对照组、PBS组大鼠,膀胱上皮紧密连接蛋白ZO-1表达明显降低(P<0.01);细胞实验中,Western Blot提示LPS组较对照组、LPS+Y-27632组、LPS+bnz-c AMP组紧密连接蛋白ZO-1表达明显降低(P<0.01),细胞荧光检测提示Y-27632造成膀胱上皮细胞ZO-1的分布定位错误,而bnz-c AMP有效减弱了LPS诱导所致的紧密连接蛋白ZO-1表达下降。结论:在LPS诱导性膀胱炎中,上皮紧密连接相关蛋白ZO-1表达下降。Rho/ROCK抑制剂Y-27632虽然能上调ZO-1的表达,但却会造成ZO-1蛋白异常分布。环磷酸腺苷类似物bnz-c AMP能有效减轻LPS造成的膀胱上皮ZO-1表达降低,在保护上皮屏障方面具有一定意义。
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