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百喜草(Paspalum notatum Flgge)是禾本科黍亚科雀稗属多年生草本植物,具多抗性优点,是一种“多用型”的优良草种,已在全球热带、亚热带地区广泛栽培,被应用于严重侵蚀地保持水土、山地陡坡治理、公路铁路护坡、江河湖堤护堤、防风固沙治沙、林下植草改良土壤、红壤果园种草免耕、红壤梯田护壁,红壤荒地人工草场建设、山边沟、农用车道草皮、牧草饲料饲养畜禽、菌草利用培植食用菌、植物净化治理污染等环境治理、环境保护与生态恢复和改善农业生态环境、生态草坪绿化环境等。本研究目的是建立百喜草高效愈伤组织再生体系,探索离体培养结合EMS诱变技术的程序和方法,以期获得各种突变体,创新种质资源和材料以培育新品种,更好地为生产服务。通过以百喜草种子为外植体,基本培养基采用MS培养基,3%蔗糖,琼脂7 g/L,pH5.8,以基本培养基附加0.5～4.0mg/L2,4-D诱导愈伤组织试验,探索诱导愈伤的最适培养基;以基本培养基附加0.5～2.0 mg/L2,4-D与0～0.6 mg/L6-BA组合处理继代培养试验筛选继代培养基;以基本培养基附加0～5.5 mg/L6-BA与0～3.0 mg/LKT组合处理进行分化试验筛选分化培养基;以1/2MS(MS大量元素减半,铁盐、微量、有机为MS全量)为基本培养基,设置不加生长调节剂、附加1.0 mg/LNAA、附加0.5 mg/LNAA+0.4mg/LIBA三种培养基,蔗糖浓度均为1.5%,筛选生根培养基。在此基础上,以胚性愈伤组织为诱变材料,以0～0.4%EMS与0.5～4h处理时间组合处理胚性愈伤组织进行试验,探索组织培养结合EMS诱变的程序和方法。研究初步获得以下结果:1、诱导愈伤组织的最适培养基为MS+1 mg/L2,4-D,暗培养60天愈伤组织诱导率达56%,初代诱导的愈伤中就有胚性愈伤出现。2、继代培养最适培养基为MS+1 mg/L2,4-D+0.2 mg/L6-BA,愈伤增殖快并能增加胚性愈伤和保持胚性愈伤;3、分化最适培养基为MS+4.5 mg/L6-BA+2 mg/LKT,分化率达96.7%,分化的苗苗数多,较高且健壮整齐;4、生根培养基为1/2MS(MS大量元素减半,铁盐、微量、有机为MS全量)+0.5mg/LNAA+0.4 mg/LIBA(1.5%蔗糖),生根率达90%。5、成功建立起百喜草高效愈伤组织再生体系。6、生根组培苗洗净根部琼脂,经液培过渡培养1～2周后,移栽入土壤成活率达95%。7、EMS诱变胚性愈伤的“半致死”处理组合为0.3%EMS+3h。诱变处理后的再生生根组培苗正在田间种植,有待进一步观察鉴定。