甲壳胺抑菌抗病及吸附特性的病理学研究

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本研究通过对6种不同分子量甲壳胺(chitosan)的体内外抑菌活性及其抑菌机理(bacteriostasis mechanism)、对免疫系统和消化系统功能的影响及其降低胆固醇(cholesterol)和药物残留的特性进行了研究、探讨。初步研究结果表明,甲壳胺在体内外对多种细菌有较好的抑制作用,不同分子量其抑菌效果不同,抑菌效果随其分子量的降低而更加明显。其抑菌机理是甲壳胺能吸附和聚沉细菌,影响了细菌的膜功能,破坏细菌的细胞器(organelle),干扰了细菌细胞的生长,从而发挥其抑菌作用。甲壳胺有增强畜禽免疫功能及消化功能的作用。另外,甲壳胺还具有明显降低鸡蛋中胆固醇及磺胺二甲氧嘧啶(sulphadimidine)的作用。用二倍稀释法测定6种甲壳胺样品(编号为1#、2#、3#、4#、5#、6#)的最低抑菌浓度(minmum inhibitory concentration, MIC),并根据MIC制作含有甲壳胺的普通琼脂培养基和药敏试纸片。结果表明:1#、3#、4#、6#甲壳胺在一定浓度时对大肠杆菌(Escherichia coli) 、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、沙门氏菌(P.multocida)、巴氏杆菌(S.gallinarum)均有不同程度的抑制作用,2#、5#在试验所用浓度下抑菌效果不明显。用与MIC相同浓度配制的甲壳胺琼脂的抑菌作用与试管MIC法结果相同,而甲壳胺试纸片则需要8个MIC才有抑菌作用。根据以上试验结果以3#甲壳胺抑菌效果最明显。用电镜和光镜观察了3#甲壳胺对大肠杆菌及金黄色葡萄球菌的抑菌机理。结果发现,无论是电镜样品还是光镜样品,加入甲壳胺的试管中比没有加入甲壳胺的试管中的细菌数目明显下降;细菌被甲壳胺粘附于一起。电镜观察发现细菌的细胞膜(cell membrane)的功能紊乱,细胞内的空隙明显增大,细胞器结构破坏并浓缩。以上述试验为依据选3#甲壳胺来研究其在体内抑菌作用。选1日龄海兰公雏120只分成4组,每组30只。试验组饲喂含有2%的3#甲壳胺的基础日粮,对照组饲喂基础日粮。在5日龄时,一组、三组接种大肠杆菌,二组、四组接种巴氏杆菌。结果表明,甲壳胺能明显降低鸡只的死亡率,减轻临床症状。以3#甲壳胺为试验材料研究甲壳胺对雏鸡免疫系统和消化系统的影<WP=8>响。选1日龄海兰公雏100只随机分成两组,每组50只,自7日龄试验组饲喂含有2%的3#甲壳胺的基础日粮,对照组饲喂基础日粮。测定了14、21、28日龄时各组试验鸡血清中NDV抗体水平及胸腺(thymus) 、脾脏(spleen)和法氏囊(bursa)免疫器官指数;并连同十二指肠(duodenum)、空肠(jejunum)、回肠(ileum)、盲肠扁桃体(calcium tonsil)制作石蜡切片观察淋巴器官组织发育和肠道病理变化情况。结果表明,在14日龄时胸腺指数、脾脏指数、法氏囊指数及ND抗体水平试验组与对照组相比均无差异;在21、28日龄,胸腺指数试验组比对照组高,但差异不显著;脾脏指数、法氏囊指数及ND抗体水平试验组比对照组高且差异显著。病理切片观察发现,免疫器官的发育总体上试验组好于对照组,甲壳胺对肠道无刺激作用。 以3#甲壳胺为试验材料研究甲壳胺对仔猪免疫系统和消化系统的影响。选30日龄断奶仔猪30头,分成0.1%的3#甲壳胺试验组及空白对照组。在分组后的第1、21、40、56天测定血清中猪瘟抗体水平。同时取胃、空肠制作扫描电镜样品,并在饲喂后21天进行大肠杆菌和乳酸杆菌的分离计数。结果表明,试验组的猪瘟抗体水平(antibody of hog cholera)高于对照组。甲壳胺能对胃壁(stomach wall)无刺激作用,能使消化道中的乳酸杆菌(latic acid bacteria)的数目增加,大肠杆菌的数目降低。为了验证甲壳胺的吸附特性进行了以下两个试验。选288只192日龄的高产蛋鸡随机分成3组,分别为0.1℅3#甲壳胺组、0.05%3#甲壳胺组。 分别在饲喂后的15天、30天、40天时测定鸡蛋中胆固醇含量。结果表明,甲壳胺能显著降低鸡蛋中胆固醇的含量。选192只232日龄的高产蛋鸡随机分成2组,每组96只。分别为0.1℅3#甲壳胺和0.05℅磺胺二甲氧嘧啶、0.05℅磺胺二甲氧嘧啶。饲喂期为5天,测定鸡蛋中磺胺二甲氧嘧啶的残留量。结果表明,甲壳胺能明显降低鸡蛋中磺胺二甲氧嘧啶的残留量。
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