【摘 要】
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目的:本研究的目的是通过检测正常妊娠与重度子痫前期子宫蜕膜巨噬细胞M1型与M2型分型转换及两组蜕膜巨噬细胞中mi R-99b-5p的表达量,同时进行巨噬细胞培养进一步验证巨噬细胞极化与mi R-99b-5p的相关性。方法:选取2020.01至2022.01在中国医科大学附属第一医院产科住院行剖宫产分娩患者为研究对象,根据纳入与排除标准选取正常妊娠妇女25例纳入对照组,选取符合重度子痫前期诊断的22
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目的:本研究的目的是通过检测正常妊娠与重度子痫前期子宫蜕膜巨噬细胞M1型与M2型分型转换及两组蜕膜巨噬细胞中mi R-99b-5p的表达量,同时进行巨噬细胞培养进一步验证巨噬细胞极化与mi R-99b-5p的相关性。方法:选取2020.01至2022.01在中国医科大学附属第一医院产科住院行剖宫产分娩患者为研究对象,根据纳入与排除标准选取正常妊娠妇女25例纳入对照组,选取符合重度子痫前期诊断的22名孕妇纳入实验组。首先,对纳入研究对象的一般资料进行收集。然后采集胎盘蜕膜母体面的蜕膜组织,处理为单细胞悬液后进行磁珠分选,根据CD14+表达分选出巨噬细胞。进而运用实时定量荧光PCR技术检测对照组和实验组蜕膜巨噬细胞M1和M2型细胞因子m RNA的表达量,选取的M1型巨噬细胞的细胞因子为IL-6、IL-12B和TNF-β,M2型巨噬细胞的细胞因子为IL-10和TGF-β,也运用Western Blotting检测对照组与实验组蜕膜巨噬细胞M1与M2型细胞因子的表达量,选取的M1型巨噬细胞的细胞因子为i NOS,M2型巨噬细胞的细胞因子为ARG-1。最后,培养巨噬细胞,进行细胞转染,设置以下分组:NC组、mimic NC组、inhibitor NC组、mi R-99b-5p mimic组以及mi R-99b-5p inhibitor组,通过实时定量荧光PCR技术和Western Blotting检测每组巨噬细胞细胞因子的表达量。结果:对照组与实验组的一般资料方面,实验组与对照组中的孕妇在年龄、孕周、BMI的差异均无统计学意义（P＞0.05）,但相较于对照组,实验组患者的收缩压、舒张压及尿蛋白均升高,新生儿转入NICU的比例增加,以及新生儿出生体重降低（P＜0.05）。运用磁珠分选出蜕膜巨噬细胞,利用流式细胞术检测,巨噬细胞纯度可达97%。相较于对照组,实验组M1型巨噬细胞的细胞因子（IL-6、IL-12B、TNF-β和i NOS）表达量增加,而M2型巨噬细胞的细胞因子（IL-10、TGF-β和ARG-1）表达量减少,且实验组蜕膜巨噬细胞mi R-99b-5p表达量相较于对照组增多。细胞实验结果显示,mi R-99b-5p mimic组与mimic NC组相比,M1型巨噬细胞细胞因子（IL-6、IL-12B、TNF-β和i NOS）表达量增多,而M2型巨噬细胞细胞因子（IL-10、TGF-β和ARG-1）表达量减少,且mi R-99b-5p inhibitor组与inhibitor NC组相比,M1型巨噬细胞细胞因子（i NOS）表达量减少,而M2型巨噬细胞细胞因子（ARG-1）表达量增多。结论:本研究初步探究了正常妊娠及重度子痫前期蜕膜巨噬细胞的分型转换,以及两组蜕膜巨噬细胞中mi R-99b-5p的表达量对比,同时培养巨噬细胞进一步验证mi R-99b-5p可能通过调控蜕膜巨噬细胞分型转换参与子痫前期发病与发展。
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