目的:通过临床观察,可以证实“补肾生肝法”（加味济生肾气汤）能有效的治疗乙肝肝硬化患者,且能促进促红细胞生成素（EPO）的分泌;通过动物实验,可以证实“补肾生肝法”（加味济生肾气汤）是通过促进EPO分泌来促进骨髓间充质干细胞归巢至肝脏,并初步探讨其作用机制。方法:临床观察:收集84例脾肾阳虚证乙肝肝硬化患者,按随机数字表法随机分为对照组和治疗组,各42例。对照组予恩替卡韦分散片或恩替卡韦胶囊治疗,0.5mg/次,1次/天;治疗组在对照组治疗基础上加用加味济生肾气汤,两组患者疗程均为6个月,每3个月完善一次相关指标检测。疗程结束后分别治疗两组患者治疗前后临床症状积分、中医临床疗效、肝功能（ALT、AST、ALB）及血清EPO水平、血清HBV-DNA转阴率、肝脏硬度值、肝脏B超积分、研究安全及不良反应。动物实验:将58只SPF级SD健康大鼠适应性喂养7天,从中随机分出4只大鼠处死后取其骨髓间充质干细胞进行细胞培养,随机分出8只健康大鼠作为空白组,其余大鼠进行肝硬化造模,共诱导8W复制肝硬化大鼠模型,第8周随机选择4只大鼠处死,取其肝组织病理切片以证明肝硬化造模成功。造模过程中有2只老鼠死亡。将造模成功的40只肝硬化大鼠随机分为模型组、单用加味济生肾气汤组、单用BMSCs移植组、BMSCs移植联合加味济生肾气汤组、BMSCs移植+EPOR拮抗剂+加味济生肾气汤组加上空白组共6组,每组大鼠8只。模型组不给予任何干预;空白组予饮用水灌胃;单用加味济生肾气汤组给予加味济生肾气汤灌胃;单用BMSCs移植组给予尾静脉BMSCs移植;BMSCs移植联合加味济生肾气汤组予尾静脉BMSCs移植联合加味济生肾气汤灌胃;BMSCs移植+EPOR拮抗剂+加味济生肾气汤组予尾静脉BMSCs移植、尾静脉注射EPOR拮抗注射液、加味济生肾气汤灌胃。加味济生肾气汤、饮用水灌胃均为每日1次,8.75g/kg/d,BMSCs移植为每周1次,从第9W初起,连续4W,至12W末。干预结束后,观察大鼠一般情况,12W后大鼠禁食12h,然后予腹主动脉采血并获取肝脏组织。HE染色观察各组大鼠肝脏组织病理状态、采用全自动生化检测仪检测小鼠肝功能（ALT、AST、ALB）;ELISA法检测各组大鼠外周血清EPO、肝细胞生长因子（HGF）水平;Western blot法检测各组大鼠肝组织中EPOR、c-met、SDF-1、CXCR4蛋白的表达情况。结果:临床观察:治疗结束后,治疗组患者临床症状积分、中医临床疗效、肝功能（ALT、AST、ALB）及血清EPO水平、血清HBV-DNA转阴率、肝脏硬度值、肝脏B超积分较治疗前均明显改善;对照组患者临床症状积分、中医临床疗效、血清HBV-DNA转阴率、肝功能（ALT、AST）、肝脏彩超积分较治疗前均有改善,而对照组的EPO、ALB水平未见明显改变。治疗组与对照组患者治疗6个月后临床症状积分、中医临床疗效比较有显著差异（P<0.01）;治疗组与对照组患者ALT、AST水平治疗3个月后比较有差异（P<0.01）,治疗6个月后比较无明显差异（P>0.05）;治疗组与对照组患者治疗3个月、6个月后ALB水平比较有显著差异（P<0.01）;治疗组与对照组患者分别治疗3个月、6个月后EPO水平比较有显著差异（P<0.01）;治疗组与对照组患者分别治疗3个月、6个月后血清HBV-DNA转阴率比较无明显差异（P>0.05）;治疗组与对照组患者治疗分别治疗3个月、6个月后肝脏硬度值比较有显著差异（P<0.01）;治疗组与对照组患者治疗治疗6个月后肝脏B超积分改善有效率比较有显著差异（P<0.01）。两组患者在治疗过程中未出现毒副作用及不良反应。动物实验:大鼠一般情况:经干预治疗后,加味济生肾气汤组、单用BMSCs移植组、BMSCs移植联合加味济生肾气汤组、BMSCs移植+EPOR拮抗剂+加味济生肾气汤组大鼠一般情况较模型组改善,其中BMSCs移植联合加味济生肾气汤组大鼠情况改善最佳。肝脏组织病理学提示:模型组大鼠肝组织病理:假小叶形成且结构紊乱,肝细胞排列紊乱,严重纤维组织增生,肝细胞坏死,炎性细胞侵润。经过不同干预,与模型组相比,各干预组大鼠的肝小叶结构、纤维化、肝细胞坏死及炎性细胞均存在不同程度的改善,其中BMSCs移植联合加味济生肾气汤组大鼠情况改善最佳。各组大鼠肝功能（ALT、AST、ALB）比较:与空白组相比,模型组大鼠,ALT、AST水著升高、ALB水平下降,差异有统计学意义（P<0.01）;与模型组相比,加味济生肾气汤组、单用BMSCs移植组、BMSCs移植联合加味济生肾气汤组、BMSCs移植+EPOR拮抗剂+加味济生肾气汤组大鼠肝功能ALT、AST均有不同程度下降,ALB不同程度升高,差异有统计学意义（P<0.01）,其中而BMSCs移植联合加味济生肾气汤组大鼠ALT与AST下降、ALB上升最佳,与加味济生肾气汤组、BMSCs移植组、BMSCs移植+EPOR拮抗剂+加味济生肾气汤组相比,差异有统计学意义（P<0.01）。血清EPO、HGF水平:与空白组相比,模型组大鼠,EPO、HGF水平下降,差异有统计学意义（P<0.01）;与模型组比较,加味济生肾气汤组、BMSCs移植联合加味济生肾气汤组、BMSCs移植+EPOR拮抗剂+加味济生肾气汤组大鼠EPO、HGF水平均有升高,差异有统计学意义（P<0.01）,而单用BMSCs移植组大鼠EPO、HGF水平稍升高,差异无统计学意义（P>0.05）,其中BMSCs移植联合加味济生肾气汤组大鼠EPO、HGF水平升高最明显。肝组织中EPOR、c-met、SDF-1、CXCR4蛋白的表达:与模型组相比,加味济生肾气汤组、单用BMSCs移植组、BMSCs移植联合加味济生肾气汤组、BMSCs移植+EPOR拮抗剂+加味济生肾气汤组肝组织中EPOR、c-met、SDF-1、CXCR4蛋白水平均有变化,差异有统计学意义（P<0.01）,而BMSCs移植联合加味济生肾气汤组EPOR、c-met、SDF-1、CXCR4蛋白水平升高最明显,与加味济生肾气汤组、单用BMSCs移植组、BMSCs移植+EPOR拮抗剂+加味济生肾气汤组比较,差异有统计学意义（P<0.01）。结论:临床观察表明,恩替卡韦分散片或（恩替卡韦胶囊）联合济生肾气汤治疗脾肾阳虚证乙肝肝硬化患者可明显降低临床症状积分,提高中医临床疗效,改善肝功能（ALT、AST、ALB）,提高血清EPO水平,促进HBV-DNA转阴,降低肝脏硬度值及肝脏B超积分,无不良反应,安全可靠。动物实验表明,BMSCs移植联合加味济生肾气汤可以较好的治疗肝硬化,这可能通过EPO/EPOR-HGF/c-met通路,激活SDF-1/CXCR4轴有关,为我们今后应用中医药联合BMSCs移植治疗肝硬化研究提供一定的基础。