目的 探讨人星形细胞瘤中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的表达及其与肿瘤微血管密度(MVD)、肿瘤病理级别的相互关系及临床意义。 方法 1、标本来源：收集我科1999年4月—2002年3月三年间手术切除的全部原发性星形细胞肿瘤石蜡标本，按照1993年WHO制定的中枢神经系统肿瘤分类标准重新确定病理诊断和分级，共计得到标本46例，其中包括Ⅰ级10例、Ⅱ级9例、Ⅲ级15例和Ⅳ级12例。另取2002年3月—2002年6月间行脑室肿瘤切除术时内减压切除的脑组织，制成石蜡标本作为对照组，共计7例。 2、免疫组化染色方法 采用链菌素亲生物素-过氧化物酶法(SP法)进行免疫组织化学染色，以乳腺癌标本染色作为阳性对照，以磷酸盐缓冲液代替一抗染色作为阴性对照。 3、结果判定 HIF-1α阳性反应均定位于细胞核，凡细胞核出现明显深棕色颗粒者定义为阳性细胞。每张切片随机选择5个高倍视野(×400)，计算每个视野阳性细胞的百分数，取平均值，结果用±s表示。肿瘤MVD按照Hansen报道的方法，先在低倍镜(×40)下扫视整个视野的肿瘤区域，选择其中高血管密度区，即“热点”(hotspots)，然后在高倍镜(×200)下计数3个视野被抗CD34抗体染成棕色的血管数，取平均值，以X述表示。 4、统计学处理 所得数据用SPSS 10．0统计软件包进行分析，用 S－N－K检验进行两两比较，用 Spe－an等级相关分析检验 HIF－la、MVD与肿瘤病理级别的相互关系。 结 果 正常脑组织中未见 HIF－la表达，各级星形细胞瘤中均有HIF－la表达，其表达强度随星形细胞瘤病理级别的增高而加强，其标记指数为：二级：3．81。2．45，11级：10．36。3．43，皿级：24．34。10．76J级：30．82。13．57，方差分析显示，相邻的组间有时差异并不显著，如：星形细胞瘤1级与星形细胞瘤11级、星形细胞瘤皿级与星形细胞瘤w级河＞0．05厂其余各组间比较均有显著差异u＜o．05人在正常脑组织中，C阴4抗体标计的微血管可见少量分布，星形细胞瘤中微血管的分布明显增加，200倍视野下的血管数为：对照组：且．67。二．29，1级：14．ZO。5．＊，n级：21．见土7．03，亚级：28．07。10＊0J级：40．03 SIS．41，方差分析显示，星形细胞瘤1级与星形细胞瘤11级、星形细胞瘤11级与星形细胞瘤皿级差异不显著河＞O．05人其余各组间比较均有显著差异河＜o．·05）。SPeannan等级相关分析显示 HIF－la表达和 MVD均与肿瘤病理级别正相关，其相关系数分别为0．79，O．7o汀＜o．01XmF司 表达和＊＊D也表现出正相关，其相关系数为0．63瞩＜0＊1）。 讨 论 在肿瘤发生过程中，其增生速度超过血管生成的速度而造成局部缺氧，肿瘤细胞适应缺氧环境所采取的策略是提高糖酵解速率和形成多血管体系。HIF－l是Semenza在研究缺氧诱导的红 ·2·细胞生成素时于1991年首先发现的，目前，其在肿瘤病理中的作用与地位日益引起重视。HIF一二是一个转录因子，由HIF叫。和HIFJ p两个亚基组成。其中，HIFJ a是惟一的氧调节亚单位，它决定HIF一二的活性。HIF一二受缺氧调控，其表达随细胞内氧浓度的下降而增加，某些癌基因、抑癌基因可调控HIF一二表达，此外一氧化氮（NO）和某些金属二价阳离子均可调节HIF一二的活性。HIF一二的靶基因涉及肿瘤细胞能量代谢、血管生成、肿瘤转移、离子代谢和儿茶酚胺代谢，主要编码：红细胞生成素uPO人血管内皮生长因子（VEGF人血红素氧合酶1，葡萄糖转运因子1、3，3磷酸甘油醛脱氢酶（GAPDll人诱导型一氧化氮合酶（iNOSX胰岛素样生长因子2门GF’2人胰岛素样生长因子结合蛋白，内皮素1，转铁蛋白及糖酵解酶类。 本实验结果表明，正常脑组织中未见 HIF－la表达，各级星形细胞瘤中均有 HIF－la表达，其表达强度与星形细胞瘤病理级别和MVD正相关。这说明，HIF－1。在星形细胞瘤发展中对缺氧的适应和血管生成过程中起着重要的作用，并可能对肿瘤的发生发展和预后产生一定的影响。同时，星形细胞瘤组织中的MVD值明显高于正常对照组，并随星形细胞瘤病理级别的增高而加强，说明在肿瘤组织中确实存在血管生成增加，由 HIF－la介导的VECF高表达可能是其中最重要的通路之一。HIF－la成为肿瘤血管生成活动的重要启动因子，进而对肿瘤的侵袭、浸润、转移乃至预后产生影响。 HIFJ 转录调节众多下游靶基因，最终促进肿瘤加速生长。浸润和转移，可见 HIF一 起着“最后通路”作用。故而阻断 HIF叫a的活性可能会是一种新的肿瘤治疗手段，有研究发现通过药物减低 HIF－la活性可抑制 VVEGF介导的肿瘤血管生成，另外，HIF－la用于基因治疗的实验也正在进行，并取得一定进展。 本实验通过对星形细胞瘤中 HIF－la的表达与肿瘤血管密 ·3· 度的研究，将肿瘤发展中对缺氧的适应和血管的生成结合起来，并