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目的:观察经皮穴位电刺激干预后大鼠心肌细胞自噬、凋亡情况以及PKCδ、PKCε表达的变化,比较一次性大强度运动和不同形式的经皮穴位电刺激对大鼠心肌细胞的影响,探讨二者对运动心脏的作用机制,为中医传统方法在运动医学领域的应用提供理论依据。方法:健康雄性Sprague-Dauley(SD)大鼠24只,体重210±10 g,两月龄,随机分为4组,每组6只:无负重运动组(E)、6%负重运动组(EG)、6%负重加中频穴位电刺激预处理组(MEG)、6%负重加中频穴位电刺激后处理组(AEG),大鼠的运动时间为2小时。因一般运动员在休赛期都会保持小强度的训练,故本文将无负重小强度运动组(E)作为对照组。E组与EG组大鼠结束游泳运动后,立即断颈处死获取完整心脏;MEG组在游泳前半小时给予经皮穴位电刺激预处理,游泳结束后立即断颈处死,取完整心脏;AEG组在游泳后即刻给予穴位电刺激处理半小时,处理完后取材。刺激穴位为足三里和内关。通过HE染色、电镜观察心脏结构改变,运用免疫印迹试验(Western Blot)检测心肌细胞LC3II/I、Beclin1、m TOR、PKCδ、PKCε表达,Tunel检测心肌细胞凋亡。结果:1.一次性大强度运动后,大鼠心肌组织和细胞的结构形态产生一定变化,相比EG组经皮穴位电刺激的MEG组和AEG组的心肌肌纤维排列、线粒体形态、细胞核形态都有一定程度的改善,MEG组的细胞状态略好于AEG组,提示经皮穴位电刺激预处理对大鼠心肌结构保护的效果好于经皮穴位电刺激后处理。2.EG组的凋亡率显著高于E组(p<0.01);MEG组的凋亡水平有显著的下调,AEG组的凋亡也出现下调(p<0.01),但是下调的程度低于MEG组。Tunel检测结果提示,一次性大强度运动能够诱发心肌细胞的凋亡,而经皮穴位电刺激能够下调心肌组织的凋亡率,经皮穴位电刺激预处理的作用效果优于后处理。3.免疫印迹试验(Western Blot)结果显示,EG组的LC3II/I的比值显著高于E组(p<0.05),提示大强度运动能够激活自噬,MEG组的表达高于EG组(p<0.05),提示经皮穴位电刺激预处理能够进一步诱导自噬,对心脏起保护作用;AEG组的表达水平相较MEG组变化并不显著(p>0.05)。心肌细胞Beclin1的表达情况,与E组相比,EG组的表达略有下降,但降幅较小,MEG组Beclin1的表达水平提高明显(p<0.05),提示经皮穴位电刺激预处理可以上调Beclin1的表达,且具有显著差异(p<0.05);AEG组表达量亦出现上升,并具有显著差异(p<0.05),且AEG组和MEG组的表达水平差别不大,MEG组稍高一点,但差距并不明显(p>0.05),提示经皮穴位电刺激预处理与后处理对心肌Beclin1表达影响作用差别可能并不大。心肌细胞m TOR的表达,与E组相比,EG组的表达显著下调(p<0.01),而MEG组和AEG组的表达量相较于E组和EG组也均显著的下调(p<0.01),AEG组的下降趋势比MEG组更显著(p<0.01)。4.PKCδ的表达情况显示,相对E组,EG组PKCδ的表达上调;MEG和AEG组则呈下调趋势(p>0.05),提示一次大强度运动能够上调PKCδ的表达,经皮穴位电刺激则能抑制其表达上调。心肌细胞PKCε的表达情况变化不明显,各组基本都处于同一水平,没有显著性变化(p>0.05)。结论:1、一次性大强度运动(6%负重)可以同时激活大鼠心肌细胞的自噬与凋亡。2、经皮穴位电刺激可通过上调心肌细胞的自噬和抑制凋亡发生,对心肌进行保护。3、经皮穴位电刺激预处理下调心肌组织凋亡率的效果优于后处理,两者激活的自噬相关蛋白多无显著差异。4、一次性大强度运动能上调PKCδ的表达,经皮穴位电刺激预处理和后处理通过抑制大鼠心肌细胞PKCδ的过表达,发挥心肌保护作用。5、短周期一次性大强度运动和单次经皮穴位电刺激对PKCε表达无显著影响。