金刚烷胺类和利巴韦林作为人医常用抗病毒药被广泛应用在畜禽病毒疾病防治中。基于对食品动物大量使用这些抗病毒药可能导致病毒产生耐药性,进而使人类的病毒病治疗失去药物资源的担心,美国FDA和中国农业部均于2005年颁布了这两种药物在动物,尤其是食品动物的使用禁令。因此,加强这两类药物在动物可食性组织中的残留检测方法研究具有十分重要的意义。目前,该类药物在动物可食性组织中的残留检测方法主要为仪器分析方法,这类方法准确度和精密度都很高,但是仪器昂贵、样品前处理繁琐、对操作人员要求也很高,不适合于现场的高通量快速筛选。酶联免疫分析方法（Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）具有灵敏、准确、高效等优点,适合用于药物残留的大批量检测,该方法在金刚烷胺类和利巴韦林的残留检测上尚未见相关报道。本研究通过半抗原的设计与合成、抗原的合成与鉴定和单克隆抗体的制备,获得了一种能识别金刚烷胺和金刚乙胺的单克隆抗体。基于该抗体,通过样品前处理方法优化、最低检测限、准确度与精密度等性能参数的确定、动物实验及与仪器方法的比对研究,初步建立了鸡可食性组织中金刚烷胺类药物的间接竞争ELISA残留检测方法。具体如下:1.半抗原和完全抗原的合成:以金刚烷胺、金刚乙胺、金刚烷羧酸和5-羧基-2-金刚烷酮为原料合成了不同长度连接臂、不同连接位点的4种半抗原,经质谱鉴定合成成功,然后通过碳二亚胺（EDC）法、N,N二环己基碳二亚胺（DCC）法和戊二醛（GA）法分别与血蓝蛋白（KLH）、人血清白蛋白（HSA）和牛血清白蛋白（BSA）连接,制备了6类完全抗原,经紫外光谱法鉴定合成成功。2.小鼠血清的筛选:将免疫原免疫雌性Balb/c小鼠,用同源、异源包被原检测抗血清。各抗血清结果差异较大,其中AMA-HS-DCC-KLH作免疫原、RMA-EDC-BSA作包被原,筛选的抗血清能有效识别金刚烷胺和金刚乙胺并且灵敏度最高。通过单克隆抗体技术进行大量的筛选,获得了一株稳定的杂交瘤细胞株AMA/2G3。3.AMA/2G3单克隆抗体的制备:AMA/2G3细胞株染色体的平均数为102.1。利用小鼠,通过体内诱生法制备了单克隆抗体,经鉴定亚类为Ig G1。以RMA-EDC-BSA为包被原、AMA为竞争物,优化ELISA条件,建立了间接竞争ELISA方法。结果表明,抗原最佳包被浓度为1μg/m L,单克隆抗体的最佳稀释度为1:38000;标准曲线回归方程为y=-0.504x+1.1046,R~2=0.9953,IC50值为15.83±0.44μg/L（n=5）,线性范围为5-80μg/L,板内和板间变异系数均小于15%,灵敏度为2.479μg/L。该抗体对金刚乙胺的交叉反应率为70.67%。4.组织样品的检测:向鸡肉和鸡肝中添加AMA标准溶液,浓度分别为5、10、20μg/kg。样品经乙腈处理、PBS提取后用AMA/2G3细胞获得的抗体进行ELISA检测,结果表明药物回收率为69.85%-105.26%,批内和批间变异系数均小于15%,说明该ELISA检测方法有着良好的准确性和重复性。5.通过鸡喂养实验和液相色谱串联质谱法（LC-MS/MS）对比考核,结果表明该ELISA方法与仪器方法相关性良好,相关系数为R~2=0.9973,表明该ELISA方法检测结果切实可靠。以利巴韦林为原料,通过碱水解、丁二酸酐法合成两种不同连接位点的半抗原,以结构类似物腺苷为半抗原,通过偶联KLH、HSA、BSA,制备了3类完全抗原。抗原免疫小鼠获得的抗血清效价较高而无特异性,未获得利巴韦林单克隆抗体。本研究通过合理设计金刚烷胺类半抗原,制备了一种能识别金刚烷胺和金刚乙胺的单克隆抗体,初步建立了鸡肉、鸡肝中AMA的提取方法,并应用于ELISA检测,是一种简单、快捷的处理手段;本研究为抗病毒药物的新型检测技术的研发提供了基础,具有较高的学术价值和较广阔的应用前景。