【摘 要】
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目的:探讨miR-184在前列腺癌（prostate cancer,PCa）及良性前列腺增生（benign prostatic hyperplasia,BPH）组织中的表达,结合临床病症和生物信息学分析探索负载miR-184与前列腺癌的关系。探讨慢病毒过表达miR-184对前列腺癌细胞PC-3的生物活动的影响。方法:1、生物信息学分析:从GENE EXPRESSION OMNIBUS（GEO）数据
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目的:探讨miR-184在前列腺癌（prostate cancer,PCa）及良性前列腺增生（benign prostatic hyperplasia,BPH）组织中的表达,结合临床病症和生物信息学分析探索负载miR-184与前列腺癌的关系。探讨慢病毒过表达miR-184对前列腺癌细胞PC-3的生物活动的影响。方法:1、生物信息学分析:从GENE EXPRESSION OMNIBUS（GEO）数据库和The Cancer Genome Atlas（TCGA）数据库下载了499个与前列腺癌相关的病理样本,通过R语言处理数据进行差异表达分析,筛选出在前列腺癌低表达的miRNA-184。绘制ROC曲线图分析miR-184对前列腺癌的诊断价值。2、验证miR-184在前列腺癌组织的表达情况:收集来自于右江民族医学院附属医院泌尿外科患者的前列腺癌及良性前列腺增生组织样本各15例,通过实时荧光定量PCR检测组织中miR-184的相对表达量。分析miR-184相对表达量与前列腺癌患者Gleason评分的关系。3、细胞功能实验:实验分为三组:过表达慢病毒组、阴性对照组以及空白组,将过表达的miR-184慢病毒转染前列腺癌细胞PC-3转染72h过后通过荧光显微镜评估细胞转染情况以及实时荧光定量PCR检测各组细胞miR-184相对表达量;并利用CCK-8试剂盒测定转染后细胞孵育第24h、48h、72h后PC-3细胞的细胞增殖情况;再通过Transwell小室实验的测定分析PC-3细胞的侵袭能力和划痕细胞试验的观察划痕后第72h迁移范围,以及Hoechst细胞凋亡实验测定PC-3细胞的凋亡能力。结果:1、生物信息学分析:从GEO数据库和TCGA数据库下载了499个与前列腺癌相关的病理样本,筛选出33个差异miRNA,其中20个上调,13个下调,选择miR-184作为本研究的基因,通过绘制ROC曲线及AUC面积,发现miR-184对前列腺癌诊断具有一定价值（AUC=0.782 P＜0.05）。2、验证miR-184在前列腺癌组织的表达情况:前列腺癌组织中miR-184的相对表达水平（0.30±0.02）显著低于良性前列腺增生组织中miR-184的相对表达水平（1.00±0.00）,差异有统计学意义（P＜0.05）。miR-184的相对表达水平与前列腺癌患者Gleason评分差异无统计学意义（P＞0.05）。3、细胞功能实验显示:PC-3细胞经慢病毒转录感染后,经荧光显微镜及实时荧光定量PCR验证绿色荧光效率在80%以上且miR-184组中miR-184相对表达是阴性对照组四十多倍,提示转染成功,CCK-8增殖实验提示miR-184表达上调后的PC-3细胞生长缓慢,在第24h、48h、72h的细胞增殖数均低于阴性对照组和空白组,并通过生长曲线发现在孵育第72h时过表达组细胞的增殖速率明显低于阴性对照组和空白组（P＜0.05）。平板克隆形成实验显示miR-184组细胞集落显著低于阴性对照组和空白组（P＜0.05）。Transwell小室实验显示miR-184组细胞侵袭数（50.17±4.40）明显低于阴性对照组（121.83±9.35）和空白组（118.67±10.58）（P＜0.05）。细胞划痕实验显示miR-184组划痕愈合率（46.32±0.72%）显著低于阴性对照组（64.94±1.92%）和空白组（64.86±1.22%）（P＜0.05）结论:miR-184在前列腺癌组织显著下调,过表达miR-184可以抑制前列腺癌细胞PC-3增殖、侵袭、迁移,miR-184可能成为前列腺癌重要生物标志物。
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