降烟碱微生物的筛选及其初步应用

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烟碱俗称尼古丁,占烟草生物碱总量的95%以上。长期吸烟会导致对烟碱的依赖性,而过量吸入烟碱则会抑制中枢神经,麻痹心脏,甚至有致命的危险,在工业上利用微生物及其酶来降解烟草中的烟碱,不仅对于维护人类健康有着深远的意义,而且可以改进烟气品质,提高烟叶资源的利用率,有重大的经济效益。本文以烟碱为唯一碳源,从土壤中筛选出一株具有高效降解烟碱能力的菌株Z7,经生理生化鉴定和16S rDNA序列对比分析表明,菌株Z7与放射形土壤杆菌(Agrobacterium radiobacter)和根癌土壤杆菌(Agrobacterium tumefaciens)均有99%的同源性。经初步国际联机检索,国内外尚未报道此类微生物具有降解烟碱的能力。烟碱培养基经优化后,菌株Z7在摇床转速为220 r/min,接种量5%,初始pH 7.0,温度30℃,发酵24 h后,烟碱降解率达到86.2%。通过对菌株Z7在各个反应体系中烟碱降解能力的考察,确定了降解烟碱的酶为诱导酶,且不分泌到胞外。由于菌株Z7具有较高效的降解烟碱的能力,所以考虑利用它来降解烟丝中的烟碱含量。经研究发现,在云南烤烟烟丝B2F上喷洒10%的菌株Z7,于温度为30℃、相对湿度为75%的恒温恒湿箱中放置9天,烟碱的降解率达到40.1%;在同样的发酵条件下,湖北白肋烟的烟碱含量下降了35.6%,也有很好的效果,说明菌株Z7具有普适性。且云南烤烟烟丝B2F经菌株Z7发酵后,通过对其水溶性总糖、总氮、蛋白质的测定,发现菌株Z7不仅能降解烟丝中的烟碱,还能有效地提升烟支的抽吸品质,说明菌株Z7具有较高的工业应用价值。
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