沉默Cathepsin D对DADS抑制MGC803细胞迁移与侵袭的影响

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目的:探讨沉默组织蛋白酶D(cathepsin D,Cath-D)对二烯丙基二硫(diallyldisulfide,DADS)抑制人胃癌MGC803细胞迁移与侵袭的影响,阐明DADS抑制胃癌迁移与侵袭的分子机制。方法:首先通过脂质体转染方法将Cath-DsiRNA转染进人胃癌MGC803细胞,获得MGC803的重组细胞系;用30mg/L的DADS处理MGC803的重组细胞系与人胃癌MGC803细胞;RT-PCR和Western blot检测DADS处理前后三组细胞株(Cath-D siRNA干扰组、阴性对照组和空白对照组)中Cath-D的mRNA与蛋白表达变化;划痕实验和Transwell实验分别检测DADS处理前后三组细胞株(Cath-D siRNA干扰组、阴性对照组和空白对照组)的迁移与侵袭能力的变化。结果:沉默Cath-D后,Cath-D mRNA与蛋白的表达水平明显下降(P<0.05),划痕距离明显增宽(P<0.05),穿膜细胞数明显减少(P<0.05)。DADS作用人胃癌MGC803细胞24h后,Cath-D mRNA和蛋白表达水平明显下降(P<0.05),划痕距离明显增宽(P<0.05),穿膜细胞数明显减少(P<0.05);并且,Cath-D siRNA干扰组加DADS处理后Cath-D mRNA与蛋白的表达水平下降最为明显(P<0.05),划痕距离最宽(P<0.05),穿膜细胞数最少(P<0.05)。结论:1.沉默Cath-D可抑制人胃癌MGC803细胞迁移与侵袭。2.沉默Cath-D能增强DADS对人胃癌MGC803细胞迁移与侵袭能力的抑制作用。
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