【摘 要】
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目的1.研究肝素酶基因在人膀胱移行细胞癌T24细胞中的表达情况2.研究小干扰RNA沉默肝素酶基因后对MMP-2表达的影响3.研究小干扰RNA沉默肝素酶基因后对T24细胞侵袭力的影响方
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目的1.研究肝素酶基因在人膀胱移行细胞癌T24细胞中的表达情况2.研究小干扰RNA沉默肝素酶基因后对MMP-2表达的影响3.研究小干扰RNA沉默肝素酶基因后对T24细胞侵袭力的影响方法体外化学合成肝素酶特异性双链RNA(dsRNA),用脂质体2000转染入T24膀胱移行细胞癌细胞,反转录聚合酶链法(RT-PCR)检测肝素酶基因mRNA的表达,Western-Blot法检测肝素酶基因蛋白的表达,细胞免疫组化方法检测T24细胞中MMP-2的表达情况,细胞划痕实验检测基因沉默肝素酶位点对细胞侵袭力的影响。结果肝素酶基因在人膀胱移行细胞癌细胞系T24中呈高表达状态。RNA干扰沉默T24膀胱移行细胞癌细胞肝素酶基因后,T24细胞肝素酶mRNA及蛋白表达水平明显下降,与各对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05)。阻断肝素酶基因后,T24细胞中MMP-2的表达也明显下降,细胞侵袭能力也随之下降,差异与各对照组比较均具有统计学意义(P＜0.05)。此外,我们还发现E-钙粘着蛋白在T24细胞中不表达。结论1.肝素酶在人膀胱移行细胞癌T24细胞的mRNA及蛋白水平高表达。2.特异性siRNA沉默T24细胞肝素酶基因后MMP-2表达降低。3.特异性siRNA沉默肝素酶基因后,T24细胞侵袭力下降。4.肝素酶在膀胱肿瘤的侵袭和转移中起着重要作用,是很好的基因治疗靶点。
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