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背景:类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种由滑膜炎症引起的自身免疫性疾病,以骨和软骨的破坏为特征的慢性多发性关节炎,致残率高。到目前为止,临床上常用糖皮质激素、改变病情抗风湿药(传统DMARDs,多为免疫抑制剂)、生物制剂DMARDs等药物治疗类风湿关节炎。但许多患者长期用药后治疗效果欠佳或病情好转后复发,其原因可能是长期用药的患者对药物产生了多药耐药性(multidrug resistance,MDR)。研究发现,ABC转运蛋白家族介导的靶细胞药物排出增加是产生MDR最关键的机制,而炎性细胞因子在此过程中发挥一定作用。我们前期研究成果已经证实在RA患者淋巴细胞中白介素(interleukin,IL)-1β、IL-6、IL-17参与调控P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)的表达,并存在一定的时间和浓度依赖性。而乳腺癌耐药蛋白(breast cancer resistance protein,BCRP/ABCG2)作为第一个被发现位于细胞膜的ABC半转运蛋白,也是一种高效的外排泵,可吸收体内的药物和外源性物质并将其排泄或重新分布。炎性细胞因子IL-1β在RA发病和进展的整个阶段都发挥重要作用,可加重炎症反应。滑膜成纤维细胞(Fibroblast-like synoviocytes,FLS)与多种炎症细胞和细胞因子相互作用,参与RA的发生发展。但IL-1β对RA滑膜成纤维细胞上BCRP的表达是否产生影响尚不明确,国内外尚无报道。因此,我们探索炎性细胞因子IL-1β对RA滑膜成纤维细胞BCRP表达的调控作用,为RA耐药机制的研究及逆转策略提供研究基础。目的:通过检测不同浓度的IL-1β作用不同时间后对类风湿关节炎患者FLS的BCRP表达的影响,探索IL-1β对BCRP介导MDR的调控作用。方法:通过骨关节手术提取3例类风湿关节炎患者和3例骨关节炎(Osteoarthritis,OA)患者的滑膜组织,获取滑膜成纤维细胞,并建立体外细胞培养体系,培养至V代左右进行下一步实验:1)用RT-PCR的方法分别测RA与OA滑膜成纤维细胞BCRP mRNA的表达水平,并进行比较;2)收集相关患者的临床、实验室资料,并进行疾病活动度评分(DAS28),观察病情活动度与BCRP mRNA的表达水平的关系;3)将RA的FLS分为A、B、C、D 4组,分别给予不同处理:A组为细胞对照组,B组加入20ng/ml的IL-1β,C组加入50ng/ml的IL-1β,D组加入100ng/ml的IL-1β,分别培养24小时、48小时、72小时,用RT-PCR的方法测BCRP mRNA的表达水平,观察比较不同浓度及不同时间点IL-1β对BCRP mRNA表达水平的影响。结果:1.RA患者滑膜成纤维细胞BCRP mRNA表达水平明显高于OA组(P<0.05)。2.类风湿关节炎患者滑膜成纤维细胞BCRP mRNA的表达量与病程、血沉、C反应蛋白及DAS28呈正相关趋势,而与发病年龄呈负相关趋势,与性别无相关性。3.相同浓度IL-1β刺激不同时间条件下的RA滑膜成纤维细胞BCRP mRNA的表达水平比较:在IL-1β的浓度为0ng/ml、20ng/ml、100ng/ml组时间水平存在差异(P<0.05)。在IL-1β的浓度为0ng/ml条件下,48h组和72h组较24h组BCRP mRNA的表达水平均升高(P<0.05);在IL-1β的浓度为20ng/ml或100ng/ml的条件下,72h组BCRP mRNA的表达水平较24h组明显升高(P<0.05)。4.不同浓度IL-1β刺激相同时间条件下的RA滑膜成纤维细胞BCRP mRNA的表达水平比较:在72h时,100ng/ml组较0ng/ml组BCRP mRNA表达升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:1.与OA患者相比,RA患者滑膜成纤维细胞BCRP mRNA表达明显升高,提示RA中存在BCRP介导的耐药性。2.RA患者滑膜成纤维细胞上BCRP mRNA的表达可能与疾病的病情活动度有相关性。3.IL-1β对RA患者滑膜成纤维细胞刺激的时间和浓度与BCRP mRNA的表达水平有相关性,且对时间的依赖性较浓度依赖性更明显。这提示IL-1β参与RA中BCRP介导的多药耐药性,为探索其耐药逆转机制奠定了研究基础。