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本文以马脾脱铁蛋白（Horse spleen apoferritin,HSF）和海藻酸钠（Sodium alginate,SA）作为纳米包埋载体,利用铁蛋白在极酸条件下可逆组装特性和海藻酸钠的控释作用,包埋血管紧张素转化酶（Angiotensin converting enzyme,ACE）抑制肽丙氨酸-组氨酸-亮氨酸-亮氨酸（Ala-His-Leu-Leu,AHLL）,以期提高ACE抑制肽AHLL在消化系统中的吸收效果。以包封率为评价指标,优化实验条件。使用纳米粒径仪和透射电子显微镜观察纳米粒表征,运用光谱扫描比较包埋处理后蛋白质结构变化,研究紫外辐射、温度及pH值对纳米粒稳定性的影响。在模拟体外消化对AHLL纳米粒吸收效果后,建立并验证Caco-2细胞单层模型,运用该模型进行HSF-AHLL肠吸收机制研究。本文得出的主要结论如下:（1）制备纳米粒的最优条件是:载体铁蛋白浓度在12μM之间,多糖浓度10mg/L,AHLL的终浓度在100200μg/mL范围内,可制备出包封率较高的纳米粒体系。通过粒径和电位测定,AHLL极有可能被包埋进HSF空腔中,且经过透射扫描电镜对其表征,表观上说明HSF-AHLL和HSF-SA-AHLL形成了稳定的纳米体系。（2）紫外光谱说明AHLL纳米粒具有与HSF类似的大分子共轭结构;荧光光谱说明AHLL纳米粒只是改变了铁蛋白在四重轴通道上的色氨酸微环境;从圆二色谱中可知:经过包埋处理后蛋白质的α-螺旋结构和β-转角结构含量显著减少,而β-折叠结构含量增加,说明包埋后的蛋白空间结构发生一定的变化,从而使蛋白质更加展开。紫外光照24 h后,HSF-AHLL和HSF-SA-AHLL的降解率比单独的AHLL分别降低了35.83%和43.86%;不同温度处理60 min,80℃处降解率分别降低了26.96%和38.51%,说明HSF-AHLL和HSF-SA-AHLL较游离的AHLL光照和热稳定性显著提高。pH值对纳米粒稳定性的影响说明,中性环境下HSF-AHLL纳米粒的稳定性最好。DSC实验说明:包埋处理后的铁蛋白结构更加展开,与AHLL氢键的相互作用加强,纳米粒的热稳定性更好。体外模拟胃肠道系统发现,由于在胃道的极酸性环境下HSF亚基会打开,HSF-AHLL相比AHLL单独进入消化系统,整体上看并没有提高ACE抑制活性;而HSF-SA-AHLL进入胃道后,SA的缓释保护作用使得AHLL不被胃蛋白酶酶解,同时HSF-AHLL顺利进入肠道,在肠道的中性条件下稳定性较好,从而有效吸收,ACE抑制活性显著提高。（3）本实验室建立的Caco-2细胞模型结果为:Caco-2细胞生长周期约为79 d,生长较为缓慢,传代的时间控制在45 d之间,消化时间控制在35 min之间;培养45 d,通过倒置显微镜观察Caco-2细胞形成致密的单层结构。培养16 d后Caco-2细胞会分化成形态上与小肠上皮细胞相似的单层模型,肠腔侧分化形成微绒毛与细胞间形成了完整的致密结构。其单层模型的跨膜电阻值基本保持在650?·cm2左右,Caco-2细胞单层肠腔侧的碱性磷酸酶活性是基底侧的碱性磷酸酶活性的17.71倍,说明出现了明显的极化现象;荧光黄AP→BL侧的转运实验,其渗透系数也低于转运实验规定的1.0×10-6cm/s。（4）运用验证过的Caco-2细胞模型研究HSF-AHLL纳米粒的细胞肠吸收机制结果为:通过MTT试验选择浓度为100200μg/mL的HSF-AHLL进行细胞转运实验。同一时间内,HSF-AHLL纳米粒明显比单独的AHLL在Caco-2细胞单层模型上转运量大,且表观渗透系数（第120 min）也明显高于后者。HSF-AHLL的双向转运均对时间有明显的依懒性,且主动运输和被动运输同时存在。HSF-AHLL在AP→BL方向转运的表观渗透系数为26.97×10-6cm/s,而BL→AP方向的为5.79×10-6cm/s,AP侧到BL侧的转运速率远大于反向转运速率,说明HSF-AHLL在Caco-2细胞单层吸收过程中吸收作用大于外排作用且具有一定方向性。HSF-AHLL在Caco-2细胞模型中的转运与温度和pH值都有关,且对样品浓度有依赖性。在HSF-AHLL纳米粒中AHLL终浓度为100μg/mL,供液pH值为7.4,温度为37℃条件下,其转运渗透系数最高。加入外排作用的蛋白抑制剂的结果表明,AHLL是P-糖蛋白的外排底物且其外排主要是由MRP2转运蛋白介导的。内吞抑制剂和肽载体抑制剂对AHLL的转运没有显著影响,而脱氧胆酸钠能显著促进其转运,证明AHLL主要是通过细胞旁路转运穿过小肠上皮细胞的。而这两种抑制剂和脱氧胆酸钠对HSF-AHLL的转运吸收没有显著促进作用,可能其是通过其他载体介导转运的。