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糖基化修饰和磷酸化修饰是两种重要的蛋白质翻译后修饰方法,但翻译后修饰蛋白或肽段在生物体内含量极低,在质谱鉴定中常常被其他中高丰度蛋白或肽段的信号所淹没。因此,发展简单快速、高效、特异的翻译后修饰蛋白的分离富集方法具有重要意义。本研究以尿液为研究对象,采用自制的C18反相固相萃取柱,结合高pH反相分离技术,分离了尿液中的蛋白质,并采用液质联用技术从尿液中鉴定到了 2550个蛋白。以多组分嵌段亲水聚合物修饰的HILIC填料为固相材料,建立了人尿液中N-糖基化修饰蛋白的富集新方法,质谱结果表明可鉴定到13