绿豆皮是绿豆的种皮,在现有的中医实践中,绿豆皮已被证实具有良好的清热解毒活性,可以一定程度缓解炎症症状。本课题以绿豆皮为实验材料获得绿豆皮醇提物,对绿豆皮醇提物中主要成分进行鉴定、分离,并比较了发芽前后绿豆皮醇提物中主要活性成分及抗氧化、抗炎活性的差异,初步探讨了发芽绿豆皮醇提物体外抗炎作用方式及可能的机制。本研究进一步完善了绿豆皮抗炎功效的理论基础,为绿豆产品工业生产中皮壳副产物的综合利用提供了依据。主要研究内容与结果如下:1.采用有机试剂浸提法获得绿豆皮醇提物,测定发芽前后绿豆皮醇提物化学成分含量,并利用高效液相色谱和液质联用技术分析鉴定绿豆皮醇提物中的主要活性成分。实验结果表明,发芽后绿豆皮中总缩合单宁含量减少,总黄酮含量增加,总糖含量减少,还原糖含量升高,其中发芽绿豆皮醇提物中总黄酮含量为52.38±0.72%,总酚酸含量为33.72±0.80%。且HPLC和LC-MS结果显示绿豆皮醇提物中主要活性成分为黄酮类物质异牡荆素,发芽前后绿豆皮中含量分别为25.73±2.55%和19.80±4.42%。绿豆皮醇提物中异牡荆素的分离纯化采用乙酸乙酯-甲醇-水（4:1:5,v/v）溶剂体系和高速逆流色谱法,纯度高达99.6%。2.发芽与未发芽绿豆皮醇提物对DPPH·自由基、羟基自由基均具有剂量依赖性清除能力,总抗氧化值分别为5.029、6.830mmol/g。测定抑制胰蛋白酶水解酪蛋白和Na-苯甲酰-DL-精氨酸-对硝基酰胺盐酸盐（BAPNA）体外抗炎活性可得,在一定浓度范围内,发芽与未发芽绿豆皮醇提物均呈剂量依赖抑制作用,具有抗炎活性。测定等量异牡荆素和发芽绿豆皮醇提物胰蛋白酶抑制活性,经线性回归分析结果提示异牡荆素可能在绿豆皮醇提物抗炎活性中起重要作用。3.建立脂多糖刺激鼠巨噬细胞RAW264.7体外炎症模型,利用噻唑蓝法测定发芽前后绿皮醇提物的细胞毒性,分别利用格里斯试剂法和酶联免疫吸附法、荧光定量聚合酶链式反应法测定发芽与未发芽绿豆皮醇提物对细胞因子、炎性介质的分泌及其相关诱导酶mRNA表达的影响。结果表明,在0-10μg/m L浓度范围内,绿豆皮醇提物对小鼠巨噬细胞RAW264.7没有细胞毒性,且能够显著抑制细胞因子TNF-α和IL-1β的分泌与mRNA表达（P＜0.05）,能够呈剂量依赖性显著抑制COX-2 mRNA的表达（P＜0.05）。其中,发芽绿豆皮醇提物的抑制活性优于未发芽样品。4.基于脂多糖诱导巨噬细胞RAW264.7体外炎症模型,采用免疫印迹法,研究发芽绿豆皮醇提物对炎症信号通路中关键蛋白的影响。结果表明,发芽绿豆皮醇提物能够呈剂量依赖作用显著抑制NF-κB的激活与核转移（P＜0.05）以及通过调控MAPKs信号通路中ERK、JNK和p38关键蛋白的表达,说明发芽绿豆皮醇提物能够通过调控NF-κB、/MAPKs信号啊通路而抑制细胞因子TNF-α、IL-1β和炎性介质相关诱导酶的合成分泌。