PDGF-AA在体外对新生猪胰岛细胞的保护作用以及其机制的研究

来源 :昆明医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhumuray
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[目的]以新生猪胰岛细胞为研究对象,探讨血小板衍生生长因子(platelet derived growth factor-AA,PDGF-AA)对新生猪胰岛细胞在体外的保护作用,并分析其可能的分子机制。[方法]1.采用双硫腙(Diphenylthiocarbazone,DTZ)染色和吖啶橙/碘化丙啶(Acridine Orange/Propidium Iodide,AO/PI)染色法评估 PDGF-AA 对新生猪胰岛细胞在体外形态和活性的保护作用。2.采用MTS检测PDGF-AA对新生猪胰岛细胞在体外增殖能力的保护作用。3.采用葡萄糖刺激胰岛素分泌实验检测PDGF-AA对新生猪胰岛细胞在体外功能的保护作用。4.采用Western Blot检测新生猪胰岛细胞经过PDGF-AA处理后细胞中促凋亡基因Bax,抑制凋亡基因Bcl-2,以及组蛋白甲基转移酶Ezh2蛋白表达的变化。[结果]1.DTZ染色和AO/PI染色结果显示经过PDGF-AA处理过后的新生猪胰岛细胞较对照组在体外培养有更好的形态和活性(P<0.05)。2.MTS结果显示经过PDGF-AA处理过后的新生猪胰岛细胞较对照组在体外培养有更好的增殖能力(P<0.05)。3.葡萄糖刺激胰岛素分泌实验结果显示经过PDGF-AA处理过后的新生猪胰岛细胞较对照组在体外培养针对葡糖糖的刺激有更强的胰岛素分泌能力(P<0.05)。4.Western Blot结果显示,经过PDGF-AA处理过的新生猪胰岛细胞较对照组可以提高胰岛细胞内Ezh2蛋白的表达(P<0.05),但是对Bax蛋白的表达没有影响(P>0.05),对Bcl-2蛋白的表达没有影响(P>0.05)。[结论]1.经过PDGF-AA处理过后的新生猪胰岛细胞,可以提高新生猪胰岛细胞在体外的形态和活性。可以提高新生猪胰岛细胞在体外的增殖和新生猪胰岛细胞在体外的释放胰岛素的功能。PDGF-AA在体外可以对新生猪胰岛细胞起到一定程度的保护作用。2.经过PDGF-AA处理过后的新生猪胰岛细胞,可以提高新生猪胰岛细胞内Ezh2的表达,通过提高Ezh2的表达起到对新生猪胰岛细胞在体外的保护作用。但是对新生猪胰岛细胞内Bax和Bcl-2的表达没有影响。
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