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第一部分呼吸道合胞病毒分子流行病学研究背景呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)是引起5岁以下儿童呼吸道感染的主要原因。方法(1)收集了2014年1月至12月郴州市第一人民医院儿童呼吸科所有因呼吸道感染的住院患儿的7种呼吸道病毒(呼吸道合胞病毒,腺病毒,A型流感病毒,B型流感病毒,副流感病毒1-3型)抗原检测资料,分析RSV的流行特点。(2)为了进一步了解RSV感染的分子流行病特点,采集了2014年RSV流行季节的RSV感染患儿的鼻咽拭子(nasal swabs,NSs)样本,采用逆转录PCR(Polymerase chain reaction,PCR)方法对RSV G蛋白基因组进行扩增,并进行测序分析,了解RSV的分子流行病学特点。(3)收集RSV感染患儿的临床资料,分析其临床特征。结果(1)RSV是引起儿童呼吸道感染最常见的病毒,主要流行季节为每年的1-5月及10-12月。(2)本研究一共鉴定了64例RSV阳性的患儿,ON1(n=13,20.3%),NA1(n=11,17.2%),BA9(n=39,60.9%),GB2(n=1,1.6%),其中ON1,NA1及BA9是引起儿童呼吸道感染的主要RSV亚型。(3)NA1亚型及BA9亚型主要感染6个月以下婴幼儿,而ON1亚型感染的各年龄段分布比较平均。(4)氨基酸分析显示所有ON1及大部分NA1亚型分别由于T251K及N249Y的氨基酸置换,失去该糖基化位点。(5)RSV主要引起下呼吸道感染(98.4%),伴有咳嗽(100%)、咳痰、发热及喘息。结论(1)RSV是引起儿童下呼吸道感染的主要病原,其中NA1、ON1及BA9亚型是主要流行亚型。(2)ON1亚型逐渐成为RSV-A的主要流行亚型。第二部分呼吸道合胞病毒感染致炎症反应机制研究背景抑制性细胞因子具有广泛的免疫抑制功能,并参与调解宿主免疫反应对抗病毒感染。然而,抑制性细胞因子在呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)感染中的功能仍不清楚。方法为了进一步探讨抑制性细胞因子在RSV感染中的作用,一共99例因RSV感染住院的患儿被纳入研究,并分为三组:组Ⅰ(年龄≤6月),组Ⅱ(年龄6-12月),组Ⅲ(年龄>12月)。同时纳入20例年龄匹配的健康对照患儿。采用Bio-Plex悬液芯片技术或酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测血浆中细胞因子表达水平,主要有1型辅助性T细胞(T Helper Type 1,Th1)类细胞因子,包括干扰素(Interferon,IFN)-γ,白介素(Interleukin,IL)-2,肿瘤坏死因子(Tumor necrosis factor,TNF)-α;2型辅助性T细胞(T Helper Type 2,Th2)类细胞因子包括IL-4,IL-13;17型辅助性T细胞(T Helper Type 17,Th17)类细胞因子IL-17;及抑制性细胞因子,包括IL-10,IL-27,IL35及转化生长因子(Transforming growth factor,TGF)-β。结果(1)RSV感染患儿的年龄分布显示,43例(43.4%)患儿年龄≤6月,33例(33.3%)患儿年龄为6-12个月,23例(23.2%)患儿年龄>12月。(2)不同年龄组之间的病程比较显示,年龄>12月患儿的病程明显比年龄≤6月及6-12月的患儿短(P值分别为0.004,0.019)。(3)与对照组比较,RSV感染患儿的抑制性细胞因子IL-10及IL-35表达水平明显增加(P值分别为0.006,<0.001);而TGF-β及IL-27在两组之间无明显差异;(4)RSV感染组与健康对照组之间Th1、Th2及Th17类细胞因子表达水平无明显差别。(5)RSV诱导的IL-10,IL-27及IL-35表达水平增加呈现出年龄相关方式,并且与病程表现出的年龄相关方式相反。(6)IL-10表达水平与RSV疾病病程呈负相关。结论(1)抑制性细胞因子IL-10、IL-35及IL-27在RSV感染疾病中促进疾病恢复,缩短疾病病程,调节机体免疫平衡,在RSV所致炎症反应机制中扮演着非常重要角色。(2)IL-10表达水平增加是影响RSV住院患儿疾病病程的重要因素。