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本研究以墨西哥落羽杉为对象,进行了体细胞胚胎发生和植株再生、器官发生和植株再生、试管无性系快速繁殖等方面的研究,主要结果如下: 1.以墨西哥落羽杉(Taxodium mucronatum)种子萌发后的下胚轴和子叶为外植体,进行墨西哥落羽杉直接体细胞胚胎发生的研究。结果表明:子叶外植体未能诱导出体细胞胚,与子叶相比,下胚轴更有利于体细胞胚胎的发生,但下胚轴培养时间的长短也直接影响体细胞胚胎发生频率。取种子萌发、子叶展开一周后的下胚轴在DCR+BA2.0mg/l+IBA0.1mg/l的培养基上直接体细胞胚发生频率可达24.5%。诱导出的体细胞胚及时转入不添加任何激素的DCR基本培养基中以促进其萌发。 2.以墨西哥落羽杉种子萌发后的下胚轴和子叶为外植体,进行器官发生的研究。结果表明:子叶未能诱导产生不定芽。下胚轴在DCR+BA2.0mg/l+IBA0.1mg/l+TDZ0.01mg/l的培养基上不定芽诱导频率为58.5%,低浓度的TDZ与BA配合使用有利于下胚轴不定芽的诱导与分化。诱导出的不定芽继代在不添加任何激素的DCR基本培养基中伸长培养,在不添加任何激素的1/2DCR基本培养基中进行生根诱导,生根诱导率可达70%以上。 3.通过幼苗和腋芽两种不同外植体来建立墨西哥落羽杉试管无性系。结果表明:幼苗在DCR+BA0.5mg/l+IBA0.2mg/l培养基上诱导分化效果最好,分化频率80%以上,平均每个外植体产芽2-5个。诱导出针叶基潜伏芽后,转入DCR+500mg/lGln中伸长生长。Gln能够促进针叶基潜伏芽的伸长生长。试管苗在3/4DCR+0.05%AC培养基中生根效果最好,生根率可达78%。选择节间较长,生长旺盛,茎干较粗壮的小苗诱导生根过程往往容易完成。根长达2-4cm时,开瓶炼苗3-7天后即可进行移栽。 4.DCR+IBA0.05mg/l+BA0.025mg/l培养基最有利于茎段腋芽的抽梢与伸长生长。腋芽针叶基潜伏芽的诱导以DCR+BA0.3mg/l+NAA0.1mg/l+Gln500mg/l培养基为最佳,加入Gln可明显提高腋芽针叶基潜伏芽的诱导率。TDZ不适宜墨西哥落羽杉腋芽针叶基潜伏芽的诱导。针叶基潜伏芽在DCR+0.1%AC的培养基中伸长效果最好,继代2-3次后即可剪切较长的芽用于生根。以腋芽针叶基潜伏芽增殖方式建立起来的试管无性系诱导生根困难,生根频率较低。 上述研究为发展墨西哥落羽杉器官发生、体细胞胚胎发生诱导技术、以及墨西哥落羽杉无性系的快速繁殖,进而开展遗传转化研究奠定了良好的基础。