~(131)I标记的抗Her-2单克隆抗体对乳腺癌细胞株的生物学效应

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一.研究目的 1.选择合适的人表皮生长因子受体-2(human epidermal growth factor receptor-2,her-2)阳性的乳腺癌细胞系和作为实验对照的her-2阴性细胞系,评价细胞对131I标记的抗her-2单克隆抗体131I-Herceptin的敏感性,推测可能对实验结果产生的影响。 2.测定131I-Herceptin对her-2阳性的乳腺癌细胞系的体外生长抑制作用及诱导凋亡作用,探讨131I-Herceptin抑制her-2阳性的乳腺癌细胞系生长的可能机制。 3.对比单纯131I-Herceptin与131I或Herceptin对her-2阳性的乳腺癌细胞系的作用差异,初步评价131I-Herceptin对乳腺癌的治疗价值,为后续的动物和临床实验131I-Herceptin应用于乳腺癌的临床治疗提供实验依据。 二.材料和方法 1.选择her-2阳性的人乳腺癌细胞系SK-BR-3细胞作为实验细胞,人乳腺癌细胞系MCF-7细胞、人肺癌细胞系A549细胞作为对照细胞,绘制其生长曲线,流式细胞仪测定对数生长期细胞表面her-2的表达率,免疫结合法、间接ELISA法测定细胞与131I-Herceptin的结合率。 2.用IODO-GEN法把131I标记到Herceptin上,用间接ELISA法测定Herceptin标记前后的在不同浓度下免疫活性。 3.131I-Herceptin对her-2阳性细胞毒性测定:①MTT比色法分别作出
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