水痘-带状疱疹病毒（Varicella-zoster virus,VZV）是一类有包膜,双链DNA病毒。一般易感染人群从儿童到成人,从呼吸道感染,进入体内,诱发水痘或者带状疱疹等皮疹。VZV病毒具有嗜神经性,它可以潜伏在神经系统中,部分人群不能完全清除,当再次激活时可以随着神经节传导引发带状疱疹等表面皮肤病或者更严重的神经验证等问题,常伴随神经疼痛的症状,可持续数月或者数年,给患者的正常生活产生很大的影响。市面上的水痘和带状疱疹疫苗大多是减毒疫苗,存在一定的安全性及复发的可能,带状疱疹疫苗在50岁以上老年人的有效力并不很好。目前对于VZV疫苗的研究都聚焦于重组疫苗,在VZV病毒包膜表面,有gE、gB、gH、gI、gK、gN、gC和gL等八种糖蛋白,其中gE蛋白因为其完整的结构,病毒表面表达最为丰富,且在病毒传播中发挥重要的作用,同时也是诱导宿主体液免疫和细胞免疫的主要抗原之一等特点,成为了重组VZV疫苗的核心蛋白。本文将对gE蛋白进行重组DNA构建,并用汉逊酵母表达系统及昆虫杆状病毒表达系统表达重组蛋白,通过对两种表达蛋白抗原性测定来对比表达系统对gE重组疫苗生产的影响。为了对比两种表达系统对gE蛋白表达的优劣,首先构建了重组质粒GAP-α-gE-p WHY-Z、AOX-α-gE-p WHY-Z以及GPsp-gE-p Fast Bac Dual分别导入汉逊酵母表达系统和昆虫杆状病毒表达系统中。利用酵母信号肽α因子以及病毒信号肽GPsp从而替换掉gE原始信号肽序列,使其可以形成分泌表达。将α信号肽引导的gE片段分别构建到p WHY-Z载体的GAP和AOX启动子下,通过对比不同启动子诱导表达的gE蛋白来寻找最优的酵母表达方式。将GPsp引导的gE片段通过蓝白斑筛选后转染进入sf9细胞进行表达。通过最终表达蛋白抗原滴度测定及蛋白量的对比,以及经济成本等因素的考虑来评估两种表达系统。构建重组质粒并分别用两种表达系统表达gE-汉逊酵母蛋白及gE-昆虫细胞蛋白,汉逊酵母发酵培养及sf9细胞盲传病毒至P5代进行抗原滴度检测,得到的结果:（1）在汉逊酵母中分别构建了两种不同启动子下的重组质粒,结果发现GAP启动子的重组质粒分泌表达蛋白要低于AOX启动子诱导表达的分泌型蛋白;（2）发酵产物检测发现,虽然设计了酵母信号肽为了得到分泌型表达蛋白,但最终结果显示胞内表达蛋白量远远高于分泌表达;（3）同样在总蛋白背景下测定抗原滴度,gE-汉逊酵母蛋白抗原滴度为1:102400/36mg,gE-昆虫细胞蛋白抗原滴度为1:1600/36mg。综上所述,通过对抗原滴度测定对比,汉逊酵母表达系统对gE重组蛋白的表达要好于昆虫杆状病毒表达系统。本实验初步从表达重组蛋白的抗原性对比了VZV的糖蛋白E在两种不同表达系统的表达,为工业生产VZV重组疫苗优化技术路线提供了思路和方向。