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目的研究日本血吸虫(Schistosoma japonicum)不同期虫体经化学裂解所获得的蛋白组分及其抗原特性,为筛选出对于血吸虫病的流行病学调查研究、预防及诊治具有应用价值的抗原分子提供理论依据。探寻酶消化法收集纯化虫卵的适宜条件,使所获虫卵纯度高,结构相对完整,以便于进一步对其进行生物学特性的研究。方法以低温(4℃)处理雌雄虫减弱其动力方法分离雌、雄虫,以反复冻融(-30℃)方法处理雌虫尽可能除去其体内的虫卵,用化学裂解的方法制备日本血吸虫尾蚴、成虫(雌虫和雄虫)以及虫卵中的可溶性蛋白抗原,用十二烷基磺酸钠一聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS—PAGE)对不同期虫体蛋白组分的相对分子量大小及分布范围进行分析;以感染后不同时间的兔血清和免疫印迹试验(Western blotting)方法,对不同期虫体蛋白组分的抗原特性进行免疫分析;利用反复过筛结合胰酶消化后离心沉淀纯化收集血吸虫卵,并和漂浮法纯化虫卵进行比较分析。结果(1)日本血吸虫的不同虫期蛋白组分:虫卵52条带,其涉及的分子量范围极广,主要在61.0kD～97kD、19.0kD～35.1kD两大区间,尤其在19.0kD～35.1kD区间处的蛋白分子含量极为丰富;其次是雄虫48条带,其分子量分布范围主要为84.2kD～97.2kD、61.0kD～76.8kD、48.4kD～55.6kD、27.8kD～35.1kD;雌虫40条带,其分子量主要分布范围分别为25.6kD～27.6kD、27.8k D～35.1kD、61.0kD～67.2kD,而尾蚴蛋白组分最少(约6条)其相对分子量分别为146kD、121kD、78.1kD、66.8kD、55.6kD、36.6kD。(2)可溶性尾蚴抗原(SCA)中78.1kD分子在与感染后6周兔血清免疫反应最强;雄虫可溶性抗原(AWA-m)中的58.5kD、55.8kD、33.6～39.8kD分子与感染兔血清随时间延长印迹反应增强;雌虫可溶性抗原(AWA-f)中的55.8kD和26.1～33.3kD分子印迹反应也是逐步增强;虫卵SEA出现的免疫反应的分子为109.5kD、105.0kD、78.1～88.7kD、68.9kD、36.6kD、27.3kD ,量多且逐步增强。(3)酶消化法在适宜条件(37℃、0.25%胰酶、适当振摇)下,所收集纯化的虫卵结构完整,得率高,纯度可达99%以上。结论血吸虫虫体用化学裂解所获得的可溶性蛋白经SDS-PAGE显示:不同虫期、不同性别的虫体,其蛋白组分具有差异性;免疫印迹结果表明:日本血吸虫的SCA中78.1kD分子,AWA中的58.5kD、55.8kD、26.1～33.3kD、33.6～39.8kD分子,SEA中的相对分子量为109.5kD、105.0kD、78.1～88.7kD、68.9kD、36.6kD、27.3kD可能具有潜在的用于诊断和防治血吸虫病的价值;酶消化法与漂浮法收集纯化的血吸虫卵的比较结果提示:酶消化法纯化血吸虫卵效果理想,更利于人们对血吸虫卵的特性进行深入研究。