背景:艰难梭菌（Clostridium difficile,CD）是院内感染和抗生素相关腹泻最重要的病原菌。肠上皮细胞是宿主肠道免疫防御的第一道防线,在抵抗艰难梭菌感染中扮演着重要角色。最近研究发现IL-27是一种重要的免疫调节因子,在艰难梭菌感染中发挥免疫保护性作用,但其分子机制不详。LL-37是目前在人类中发现的唯一一种cathelicidin类抗菌肽,CRAMP为鼠源性同质体,主要限制性表达于肠上皮细胞,发挥抗感染免疫功能。由此,我们提出科学假设:IL-27可能通过诱导肠上皮细胞表达LL-37/CRAMP,介导肠道免疫,发挥抵抗艰难梭菌感染的作用。目的:本研究聚焦于艰难梭菌感染这一公共卫生问题,从艰难梭菌与宿主相互作用的角度入手,以免疫调节因子（IL-27）调控肠上皮细胞免疫应答为切入点,探究IL-27介导艰难梭菌感染的免疫保护作用及机制,以期为艰难梭菌感染的诊治研究找到重要线索。方法:1.采用ELISA检测临床CDI患者血清及粪便中IL-27的表达情况,了解IL-27表达水平与CDI发病的相关性;此外,我们还检测了CDI患者血清CXCL10水平,评估其是否可作为监测CDI疾病严重程度和治疗效果的生物标志物。2.以WT小鼠、WSX-1^-/-（IL-27特异性受体缺陷）小鼠构建CDI动物模型,ELISA和荧光定量PCR检测CDI小鼠血清及肠道CRAMP表达水平;重组抗菌肽治疗WSX-1^-/-CDI小鼠,评估肠道炎症及组织损伤、炎症分子表达、细菌载量和小鼠生存率等方面的差异,明确IL-27促进肠上皮细胞表达CRAMP在CDI中的免疫保护作用。3.以人原代结肠上皮细胞为体外细胞模型,IL-27与艰难梭菌共刺激肠上皮细胞后检测LL-37基因和蛋白两个水平的表达;然后采用特异性小分子抑制剂处理结肠上皮细胞,Western blot检测LL-37蛋白表达,对IL-27诱导肠上皮细胞表达LL-37的细胞内信号分子进行初步探究。结果:1.临床CDI患者血清及粪便IL-27表达明显高于非CDI腹泻患者,与WBC计数、PCT、TNF-α、LL-37的浓度呈正相关,与血清白蛋白浓度呈负相关;CXCL10在CDI中高表达,且与疾病严重程度显著相关,在有效治疗后明显降低,可作为监测CDI严重程度和治疗效果的新血清标志物。2.CRAMP表达水平在WSX-1^-/-CDI小鼠中显著降低;重组抗菌肽治疗WSX-1^-/-CDI小鼠发现,肠道损伤情况减轻,对艰难梭菌清除能力及小鼠生存率明显提高,这可能与治疗后抗炎细胞因子（IL-10、IFN-γ等）的产生增加有关。3.IL-27与艰难梭菌共刺激诱导肠上皮细胞表达LL-37具有时间和剂量依赖性,经LY294002、AG490、SB203580 3种抑制剂预处理后,结肠上皮细胞LL-37的分泌显著降低,由此推测IL-27可能通过AKT、JAK-STAT及MAPK三大通路调控肠上皮细胞LL-37的表达。结论:IL-27可通过调控肠上皮细胞表达LL-37/CRAMP来抵抗艰难梭菌感染,减轻肠道炎症,发挥其免疫保护作用,为CDI与宿主相互作用机制提供了新视角;此外,CXCL10可作为识别病情较重CDI患者相对敏感的生物标志物。