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目的：初步了解磷脂酰肌醇3激酶（phosphoinositide3-kinase，PI3K）在急性发作期哮喘患者外周血T淋巴细胞中的蛋白表达情况，并观察利用PI3K特异性抑制剂LY294002阻断体外培养对急性哮喘患者及健康人外周血T淋巴细胞周期分布的影响，以探讨PI3K参与T细胞过度活化增殖在哮喘发病机制中的作用。
方法：（1）病例采集及提纯T淋巴细胞：收集2008年9月至2009年2月间20例急性发作期哮喘患者（男性12例，女性8例，平均年龄30±9.6岁）作为实验组，15例健康人（男性9例，女性6例，平均年龄28±8.9岁）为健康对照组。每一研究对象于清晨空腹时，无菌肝素抗凝抽取静脉血5ml（哮喘患者于使用激素前），Ficoll密度梯度离心法提取获得PBMC，尼龙毛柱法提纯T淋巴细胞；（2）用Western blotting法检测哮喘患者T淋巴细胞中PI3K Y蛋白的表达水平：将对数生长期的T淋巴细胞分为哮喘组（A组）、对照组（B组），再将哮喘组随机分为3组，分别进行检测；（3）用MTT法观察T淋巴细胞增殖情况：将对数生长期的哮喘患者的T淋巴细胞及正常人的T淋巴细胞分为A组（正常人不加LY294002组）、B组（正常人加LY294002组）、C组（哮喘不加LY294002组）、D组（哮喘加LY294002组），在培养24、48、72、96h后测定细胞增殖率；（4）用流式细胞仪检测细胞周期的时相分布：将对数生长期的哮喘患者的T淋巴细胞及正常人的T淋巴细胞分为E组（哮喘加LY294002组）、F组（哮喘不加LY294002组）、G组（正常人不加LY294002组），流式细胞仪检测G0/G1期、S期分布。
结果：（1）Western blotting方法检测哮喘组与对照组T淋巴细胞中磷酸化PI3Ky蛋白表达，结果显示，与正常人相比，急性哮喘发作期患者外周血T淋巴细胞中的PI3Ky蛋白表达水平显著上调。正常对照组外周血T淋巴细胞中PI3Ky蛋白表达较低（10945±960），哮喘组（20079±838.7），表达差异显著，有统计学意义（P<0.01）；3个哮喘组间比较差异无统计学意义（P>0.05）。（2）MTT结果显示：在24h点，A组增殖率（0.309±0.088）、B组增殖率（0.272±0.014）、C组增殖率（0.630±0.051）、D组增殖率（0.470±0.050）；在48h点A组增殖率（0.269±0.005）、B组增殖率（0.230±0.013）、C组增殖率（0.565±0.040）、D组增殖率（0.435±0.052）；在72h点A组增殖率（0.309±0.009）、B组增殖率（0.272±0.014）、C组增殖率（0.627±0.051）、D组增殖率（0.473±0.050）；在96h点A组增殖率（0.274±0.007）、B组增殖率（0.245±0.010）、C组增殖率（0.587±0.046）、D组增殖率（0.410±0.041）；在24、48、72、96h时间点，A、B、C、D四组间进行组间比较，除A组与B组间差异无统计学意义以外（P>0.05），其余各组间比较，差异均有统计学意义（P<0.05）。（3）将E组、F组、G组的T淋巴细胞，用流式细胞仪检测细胞周期的时相分布。结果显示：E组G0/G1期分布比例为91.85%±7.63%，F组G0/G1期分布比例为77.40%±6.42%，G组G0/G1期分布比例为99.25%±0.01%，各组间的G0/G1期分布比例比较，差异有统计学意义（P<0.05）；E组S期分布比例为5.21%±2.33%，F组S期分布比例为19.73%±10.63%，G组S期分布比例为0.046%±0.076%，各组间S期分布比例比较，差异有统计学意义（P<0.05）。
结论：PI3K信号转导途径活化参与了哮喘的免疫学发病机制，并在哮喘发作的T淋巴细胞增殖及细胞周期异常中起重要作用。