【摘 要】
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目的:建立BV2细胞糖氧剥夺再灌注(OGD/R)损伤模型;研究14,15-EET对OGD/R诱导的BV2细胞炎症反应的影响。方法:参照文献方法培养及鉴定BV2细胞。摸索BV2细胞OGD/R模型的建立条
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目的:建立BV2细胞糖氧剥夺再灌注(OGD/R)损伤模型;研究14,15-EET对OGD/R诱导的BV2细胞炎症反应的影响。方法:参照文献方法培养及鉴定BV2细胞。摸索BV2细胞OGD/R模型的建立条件。将BV2细胞随机分为Sham组(正常培养组),Vehicle组(OGD/R及DMSO干预组)以及14,15-EET干预组(OGD/R及14,15-EET干预组)。在14,15-EET的干预作用下,利用ELISA法测定BV2细胞OGD后复糖复氧0h,3h,6h,12h,24h时细胞培养液中炎性因子TNF-α的浓度;并用MTT实验检测其各时间点细胞活性的改变,再以Ki67免疫荧光染色进一步观察细胞的增殖活性。同样条件下,划痕实验和Transwell细胞迁移实验用来观察BV2细胞的迁移能力变化。结果:OGD1h时BV2细胞明显受损,并且OGD1h/R0h,3h,6h,12h,24h时细胞炎性分泌显著增强。与Vehicle组相比,14,15-EET干预组BV2细胞培养液中分泌的炎症因子浓度显著减少;细胞生存及增殖活性显著降低;迁移能力显著减弱。以上结果均以OGD1h/R12h最具统计学意义。结论:成功建立BV2细胞OGD/R模型;14,15-EET对BV2细胞OGD再灌注损伤后的增殖及炎症反应具有明显的抑制作用。有望为中枢神经系统疾病的临床抗炎治疗提供可能的靶点。
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