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目的:观察人参皂苷Rh2（G-Rh2）联合化疗药5-氟尿嘧啶（5-FU）对人结直肠癌HCT15/5-FU耐药细胞化疗敏感性的影响,研究其可能的分子机制。方法:1.通过CCK-8法检测5-FU、L-OHP对HCT15敏感细胞株以及HCT15/5-FU耐药细胞株的化疗敏感性,验证HCT15/5-FU细胞的耐药性。2.CCK-8法、平板克隆形成实验检测G-Rh2联合5-FU对耐药细胞的生长抑制作用;流式细胞术检测G-Rh2联合5-FU对细胞凋亡的影响。3.细胞划痕实验和Transwell实验检测G-Rh2联合5-FU对细胞迁移和侵袭的影响。4.蛋白印迹法检测G-Rh2联合5-FU对铜转运蛋白ATP7A、ATP7B、CTR1和凋亡相关蛋白P53、Caspase-3蛋白表达的影响。结果:1.CCK-8实验结果示化疗药物5-FU、L-OHP分别作用于HCT15和HCT15/5-FU细胞,对HCT15细胞的IC50值分别为3.13μg/mL、6.25μg/mL,对HCT15/5-FU细胞的IC50值分别为21.36μg/mL、14.27μg/mLL,耐药指数分别为6.28、2.28。2.CCK-8、平板克隆实验和流式细胞术结果示:G-Rh2联合5-FU后,对HCT15/5-FU细胞的IC50值为9.1μg/mL,逆转指数为2.35;对照组、G-Rh2组、5-FU组、G-Rh2+5-FU组的克隆形成率分别为40.4%、23.2%、15.8%、7.4%,相较于5-FU组,G-Rh2+5-FU组的克隆形成率显著降低（P<0.001）;对照组、G-Rh2组、5-FU组、G-Rh2+5-FU组总凋亡率分别为（1.13±0.20）%、（6.10±0.87）%、（11.80±2.26）%、（20.17±1.53）%。与5-FU组比较,5-FU+G-Rh2组的总凋亡率显著增高（P<0.01）。3.细胞划痕实验和Transwell实验结果表明,对照组、G-Rh2组及5-FU组在24h、48h划痕面积都在逐渐减小,划痕内的迁移细胞逐渐增多,相较于对照组,G-Rh2组及5-FU组的划痕愈合能力较弱,而这两组比较,无明显差异。G-Rh2+5-FU组在药物处理24h、48h后细胞划痕面积无明显减小,与对照组和5-FU组比较,划痕愈合能力显著减弱。耐药细胞穿过Transwell小室微孔滤过膜的数量明显多于亲本细胞。耐药细胞经药物处理后,与对照组相比,G-Rh2组、5-FU组及G-Rh2+5-FU组穿过小室微孔滤过膜的数量均有明显减少,减少程度逐渐增加。与单药组比较,G-Rh2+5-FU组细胞的侵袭能力最弱,穿过滤过膜的数量最少。4.ATP7A、ATP7B、CTR1在HCT15中低表达,在HCT15/5-FU中高表达,而P53、Caspase3的表达则相反。与对照组相比,5-FU组和G-Rh2+5-FU组中ATP7A、ATP7B的表达均降低,P53、Caspase3的表达均增高,G-Rh2组则无明显差异。与5-FU组相比,G-Rh2+5-FU组中蛋白的表达变化更加显著。各个组中CTR1的表达无明显变化。结论:1.人结直肠癌细胞HCT15/5-FU为5-FU和L-OHP交叉耐药细胞,耐药性及稳定性良好。2.G-Rh2可增强5-FU对人结直肠癌耐药细胞HCT15/5-FU的化疗敏感性,联合5-FU后可显著抑制细胞增殖,促进细胞凋亡。3.G-Rh2联合5-FU后可显著抑制抑制结直肠癌耐药细胞HCT15/5-FU的迁移和侵袭。4.G-Rh2联合5-FU可通过下调耐药蛋白ATP7A和ATP7B的表达,上调凋亡相关蛋白P53/Caspase3的表达来提高结直肠癌耐药细胞HCT15/5-FU的化疗敏感性。