大赖草遗传多样性分析和普通小麦-大赖草易位系的分子细胞学鉴定

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大赖草(Leymus racemosus,2n=4x=28)是普通小麦的近缘物种,具有耐盐、抗旱、抗多种病害等多种优良特性,尤其高抗小麦赤霉病。将其抗性基因导入普通小麦,对于拓宽小麦赤霉病抗性基础具有重要意义。利用SSR分子标记分析了大赖草材料的遗传多样性,采用分子细胞学方法筛选鉴定出了普通小麦-大赖草易位系,为小麦抗赤霉病育种提供新的种质资源。  (1)本研究利用541对SSR引物对12份大赖草材料进行PCR扩增,结果发现有217对引物能够扩增出清晰且重复性好的条带。以NTSYS-pc2.1对其进行分析。12个大赖草材料的遗传相似系数Genetic similarity(GS)变异范围为0.0617—0.9629,平均值为0.6549。通过聚类分析可将12份大赖草材料分为两大类:第一大类包括中国春和Lry16,第二大类包括Lry1、Lry3、Lry4、Lry5、Lry8、Lry10、Lry12、Lry13、Lry15、Lry17白、Lry17青。  (2)利用顺序GISH-双色FISH分析,结合小麦D组专化探针Oligo-pAs1-1和 B组专化探针Oligo-pSc119.2-1。鉴定出了3个纯合普通小麦-大赖草易位系,分别是T2DS·2DL-5LrL、T5BS-5LrS·5LrL和T3DS·3DL-5LrL。  (3)根据定位在普通小麦第7部分同源群的81对EST-STS引物,筛选出了两对特异性引物BE444644和Xksum69a。均在易位系T2DS·2DL-5LrL、T5BS-5LrS·5LrL和T3DS·3DL-5LrL和附加系DA5Lr上有特异性扩增,片段大小分别为100bp和50bp,可精准追踪含有大赖草染色体片段的易位染色体。
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