【摘 要】
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目的观察重组共表达质粒pIRES-hVEGF121cDNA/hBMP-4转染大鼠骨髓间充质干细胞（Mesenchymal Stem Cells,MSCs）后的表达及其对大鼠MSCs向成骨细胞分化的影响,为骨缺损的联合基因
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目的观察重组共表达质粒pIRES-hVEGF121cDNA/hBMP-4转染大鼠骨髓间充质干细胞（Mesenchymal Stem Cells,MSCs）后的表达及其对大鼠MSCs向成骨细胞分化的影响,为骨缺损的联合基因治疗奠定基础。方法使用全骨髓培养法分离、培养大鼠MSCs;流式细胞仪检测MSCs表面标志抗原的表达;重组共表达质粒pIRES-hVEGF121cDNA/hBMP-4经酶切鉴定后,在脂质体介导下将其转入大鼠MSCs,提取总RNA和总蛋白,进行RT-PCR和Western blot检测;茜素红染色检测转染后大鼠MSCs的成骨分化能力。结果流式细胞仪检测显示CD90表达强阳性,CD45表达阴性;重组共表达质粒pIRES-hVEGF121cDNA/hBMP-4成功转染至大鼠MSCs中,并获得有效转录和共表达;转染后第14天,茜素红染色阳性。结论hVEGF121和hBMP-4在大鼠MSCs中获有效转录和共表达,并能诱导大鼠MSCs向成骨细胞分化,为骨缺损的联合基因治疗奠定了基础。
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