电针“肠病方”逆转大鼠结肠黏膜损伤的最佳刺激参数研究

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目的:(1)通过正交实验设计,分析腧穴“肠病方”的电针频率(2Hz、30Hz、100Hz)、留针时间(10min、20min、30min)、治疗频次(1次/d、2次/d、1次/2d)对结肠黏膜损伤模型大鼠治疗作用的影响,筛选出电针腧穴“肠病方”治疗肠病的最佳刺激参数组合,并明确各刺激参数在针刺效应中的主次地位,为针刺手法量学的研究提供新的实验研究资料。(2)通过检测各组大鼠血清中IL-6和NF-κB p65的含量,揭示电针腧穴“肠病方”最佳刺激参数组合对结肠黏膜损伤的保护机制,为针灸治疗该病种的临床运用提供实验室依据。方法:实验一:110只清洁级SD大鼠,随机分为空白组(n=10);模型组(n=10);针刺干预组为9个亚组,即Ⅰ~Ⅸ组(n=10)。模型组与针刺干预组大鼠采用6%冰乙酸灌肠法建立结肠黏膜损伤大鼠模型。造模成功后,Ⅰ~Ⅸ组大鼠即刻按L9(34)正交表设计安排针刺治疗,治疗结束后规定时间麻醉取材。观察大鼠距肛门6cm~10cm的结肠黏膜损伤情况,按Wallace法计算结肠黏膜损伤指数,结合光镜下结肠黏膜组织学变化并进行统计,筛选“肠病方”的最佳刺激参数组合。实验二:在实验一中,我们已筛选出最佳刺激参数组合,称其为最优组。在此基础上,将30只清洁级SD大鼠作为研究对象,随机分为空白对照组(n=10)、模型组(n=10)、最优组(n=10)。最优组造模成功后即刻按“肠病方”最佳刺激参数组合行电针,治疗结束后规定时间麻醉取血。空白对照组、模型组除不经电针针刺,其它处理同最优组。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组大鼠血清IL-6及NF-κB p65的含量。结果:(1)正交试验结果显示,腧穴“肠病方”各项刺激参数治疗作用的显著性从大到小的排列为A>B>C,即电针频率>留针时间>治疗频次,但治疗频次对实验结果影响不显著(P>0.05)。各因素中不同水平影响大小排序为:电针频率:100Hz>30Hz>2Hz;留针时间:30min>20min=10min;治疗频次:2次/d、1次/2d、1次/d三个均可。(2)对电针腧穴“肠病方”最佳刺激参数组合的治疗机制研究结果显示:模型组IL-6及NF-κB p65含量明显升高,与空白组比较有显著性差异(P<0.05);最优组IL-6及NF-κB p65含量明显下降,与模型组比较有显著性差异(P<0.05)。结论:(1)电针腧穴“肠病方”治疗肠病的最佳刺激参数组合为:电针频率100Hz,留针时间30min,治疗频次2次/d。(2)电针腧穴“肠病方”最佳刺激参数组合能够调整大鼠血清中IL-6及NF-κB p65的含量,故腧穴“肠病方”最佳刺激参数组合的治疗机制可能与调节机体免疫功能有关。
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