【摘 要】
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主要研究银杏叶提取物及其单体成分槲皮素对己烯雌酚(DES)致成年小鼠睾丸损伤的保护作用。通过用光镜观察睾丸组织的形态学改变,检测睾丸组织及体外培养的生精细胞培养液中超氧
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主要研究银杏叶提取物及其单体成分槲皮素对己烯雌酚(DES)致成年小鼠睾丸损伤的保护作用。通过用光镜观察睾丸组织的形态学改变,检测睾丸组织及体外培养的生精细胞培养液中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性、乳酸脱氢酶(LDH)及丙二醛(MDA)含量,及用免疫组化的方法检测睾丸生精细胞增殖细胞抗原(PCNA)的表达等方法,探讨银杏叶提取物(EGb)及单体成分槲皮素(Que)保护睾丸的生精作用及可能的作用机制,寻找预防环境雌激素对雄性动物生殖系统损伤的措施。试验分为5组,A组为对照组,B组为DES损伤模型组,C-E组分别为不同银杏叶的药物预防组,EGb组采用腹腔注射的方法、Que组采用灌胃法,模型组和药物预防组均皮下给予DES 40 mg/kg·d,于给药7d后剖杀。结果表明各DES组小鼠的睾丸及精子密度显著下降(P<0.01),睾丸组织中SOD,GSH-Px活力随DES剂量增加而逐渐减少,与对照组差异显著(P<0.05);MDA含量升高,与对照组差异显著(P<0.05)。光镜下DES组小鼠睾丸生精细胞出现细胞变性,核固缩,且损伤程度与DES剂量明显相关。DES对体外培养的成年仓鼠生精细胞也有直接的损伤作用,在浓度10-7~10-4M范围内,其损伤作用随浓度的增大而增大,随培养时间的延长,测得培养液中MDA和LDH含量均显著升高(P<0.01,P<0.05)。因此DES适合作为研究雌激素对成年雄性动物睾丸损伤的模型。预先给予不同银杏叶成分后,睾丸组织中SOD,GSH-Px活力增加,LDH活性和MDA含量减少,PCNA表达增加。其中以EGb组的效果最为明显,睾丸系数升高,差异显著;睾丸匀浆液中SOD、GSH-Px活性均高于DES模型组,有显著性差异(P<0.01);相反,LDH活性和MDA含量均低于DES组,有显著性差异(P<0.01,P<0.05)。免疫组化结果表明,DES组睾丸PCNA阳性细胞密度略有下降,但与对照组相比差异不显著;但应用中药后均升高,与DES模型组相比差异显著(P<0.01,P<0.05)。所以,DES可以引起成年雄性小鼠睾丸氧化损伤。EGb和Que均能够清除自由基,抑制脂质过氧化反应,可作为一种预防性的抗氧化剂减轻这种氧化损伤,可以提高DES引起的睾丸生精细胞PCNA表达水平,其保护作用可能与促进生精上皮的增殖有关。
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