残耳软骨细胞体外增殖的实验研究

来源 :中国协和医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jaz23cn
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目的:研究残耳软骨细胞在体外扩增时生物学特性的变化,以及冻存、CDMP-1对残耳软骨细胞生长分化的影响。方法:在体外培养5~12岁先天性小儿畸形的残耳软骨细胞。通过Ⅱ型胶原免疫组织化学染色和甲苯胺兰染色方法研究残耳软骨细胞的反分化现象及CDMP-1对细胞分化的影响;通过MTT法在酶标仪上测CDMP-1对残耳软骨细胞增殖的影响;使用流式细胞仪测定冻存和CDMP-1对残耳软骨细胞周期的影响。结果:残耳软骨细胞在体外培养时随代数增加呈异染陛的糖胺多糖减少,第1、3代Ⅱ型胶原阳性细胞比例约68%~71%,第5代为23%、显著降低;冻存后第3代为65%,与同代数的细胞没有差别,100ng/mi浓度的CDMP-1可以将第4代细胞的阳性比例维持在66%,而且冻存和生长因子不会引起细胞周期的变化。CDMP-1还可以促进残耳软骨细胞增殖,有剂量-效应关系,100ng/ml为最佳效应浓度。结论:残耳软骨细胞在体外扩增时要出现反分化现象,冻存是其有效的保存手段、CDMP-1可以促进其增殖和维持表型。
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