中风康对局灶性脑缺血大鼠神经元保护作用机制研究

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目的:在建立局灶性脑缺血大鼠模型基础上,通过动物实验,探讨中风康对局灶性脑缺血大鼠神经元的保护作用及其机制,为治疗脑梗塞的临床用药提供实验依据。方法第一部分:中风康对局灶性脑缺血大鼠脑梗死体积和神经元超微结构的影响健康SD大鼠,体重250~300g。脑梗死体积的检测:动物随机分为4组,即模型组、中风康高剂量组(简称高剂量组)、中风康低剂量组(简称低剂量组)、步长脑心通对照组(简称脑心通组),每组每时间点取8只大鼠。电镜观察:动物随机分为5组,即假手术组、模型组、中风康高剂量组(简称高剂量组)、中风康低剂量组(简称低剂量组)、步长脑心通对照组(简称脑心通组),每组取3只大鼠。高、低剂量组和脑心通组从术前5天至处死前每天灌胃给药,剂量分别为:高剂量组18.8g/Kg,低剂量组9.4g/Kg,脑心通组0.33g/Kg。假手术组、模型组予0.5%的羧甲基纤维素钠液灌胃,每日1次。参照文献,采用线栓法制备大脑中动脉局灶性脑缺血模型,大鼠腹腔内注射10%水合氯醛(350mg/Kg)麻醉后,仰卧固定,颈部正中切口,分离并暴露右侧颈总及颈内、外动脉,并在颈内外动脉分叉处结扎颈外动脉,右侧颈总动脉剪口,插入头端烧成圆钝形直径为0.25mm的尼龙鱼线,进线长度约18~19mm,在大脑中动脉起始端堵塞大脑中动脉,然后将颈总动脉连同尼龙鱼线一起结扎,缝合皮肤,放回笼内,单笼喂养。假手术组只分离、暴露血管,不结扎颈总动脉及颈外动脉,不插入尼龙鱼线。选择苏醒后左上肢屈曲、行走时向左侧旋转或左侧肢体瘫痪的大鼠为栓堵成功者进行实验,否则视为栓堵失败,弃之不用。手术过程中监测大鼠直肠温度,并用电热毯保持在36.5~37.5℃。于造模成功后6h、12h、24h、48h分批检测脑梗死体积的变化,并选取梗死灶体积最大的时间点(脑缺血24h),电镜下观察神经元超微结构的变化。
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