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本试验以三年生‘妃子笑’荔枝嫩叶为试材,筛选了外植体表面消毒方法、抗褐化剂的抗褐化效果,分析了培养基种类以及激素浓度对嫩叶愈伤组织发生和继代的影响,并得出以下结论:
1、不同消毒剂浓度、不同消毒时间、不同组合的消毒处理中,最佳的消毒方法是0.1%升汞20分钟配合75%酒精10秒进行双消毒,污染死亡率为6.25%,接种成活率为78.12%。
2、活性炭、抗坏血酸、柠檬酸、PVP等抗褐化剂中,效果最佳的是200mg.L-1PVp,它对愈伤组织诱导的负面作用最小,该处理的接种成活率和愈伤组织诱导率均为96.43%。
3、愈伤组织发生过程中,基本培养基、植物生长素(2,4-D)、细胞分裂素(6-BA)、抗褐化剂等对愈伤组织诱导率的影响力大小依次是:抗褐化剂>2,4-D>基本培养基>6-BA。
4、愈伤组织增殖继代过程中褐化死亡仍然是最主要的问题,NAA1.0mg.L-1+BAP4.0mg.L-1+TDZ2.0mg.L-1的处理有最高的愈伤组织增殖率,为41.79%。
5、愈伤组织向胚性愈伤组织分化的继代培养,在BAP和NAA的浓度为1.0mg.L-1+3.0mg.L-1和2.0mg.L-1+6.0mg.L-1时,出现了最高的胚性愈伤组织发生率,分别为45%和50%。过程中有愈伤组织死亡、呈现水泽状和紧实状而失去分生能力等现象。