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目的:摘除大鼠双侧肾上腺致HPA轴损伤,采用免疫诱导建立EAMG大鼠模型,客观揭示HPA轴损伤与重症肌无力免疫相关性,同时阐明补脾强力复方通过调节HPA轴功能、提高胸腺内GRmRNA及蛋白表达从而治疗MG的相关作用机制。 方法:将Lewis大鼠140只随机分为正常对照组、假手术组、模型组、强的松组、补脾强力复方大、中、小剂量组(以下称大、中、小剂量组)。除正常组、假手术组,其余组大鼠均通过摘除双侧肾上腺致HPA轴损伤,采用免疫诱导注射鼠源性AchR-α亚基97-116肽段复制EAMG模型,评价造模成功后进行灌胃治疗,各组大鼠共治疗4周后观察各组大鼠体重、行为学及Lennon评分变化,ELISA法检测各组大鼠血清AchR-Ab、皮质醇、MBP、Th1细胞因子含量;RT-q-PCR技术、免疫组化法检测各组大鼠糖皮质激素受体基因及蛋白在胸腺内中的表达情况。 结果:1.同时摘除Lewis大鼠双侧肾上腺较分时分侧摘除显著增加大鼠死亡率。 2.HPA轴损伤EAMG大鼠较未切除肾上腺EAMG大鼠更早出现肌无力症状,行为学及症状更重,Lennon评分更高;HPA轴功能损伤基础上复制EAMG模型可增加EAMG易感性。 3.补脾强力复方可增加EAMG大鼠体重,显著下调EAMG大鼠Lennon评分,从而改善EAMG症状,其中补脾强力复方大、中剂量组对EAMG体重及Lennon评分改善显著高于补脾强力复方小剂量组。 4.HPA轴功能损伤的判定:Lewis大鼠HPA轴损伤后复制EAMG模型更具易感性,且EAMG模型大鼠血清皮质醇含量显著降低、AchR-AB及Th1型细胞因子(TNF-α、IFN-γ、IL-2)表达显著升高;下丘脑HE染色下可见下丘脑神经元细胞固缩、胶质细胞增生、纤维髓鞘脱失等病理改变,说明HPA损伤可致神经内分泌-免疫系统在功能及病理状态下相互影响。 5.补脾强力复方干预作用:补脾强力复方可有效升高EAMG大鼠血清皮质醇,并降低Th1型细胞因子、AChR-Ab表达,整体而言,补脾强力复方大、中剂量作用优于小剂量组。在调控胸腺内GR基因及蛋白方面,与假手术组比较,模型组GRmRNA相对表达量及蛋白表达均不同程度降低,均具有显著差异(P<0.05)。与模型组比较,补脾强力复方各剂量组、强的松组GR mRNA及蛋白表达均有不同程度上升,其中补脾强力复方大剂量组在上调GRmRNA表达上具有极显著差异(P<0.01);补脾强力复方大剂量组、中剂量组在上调GR蛋白阳性表达方面均具有极显著性差异(P<0.01)。HE染色中,部分EAMG模型组大鼠胸腺组织可见滤泡性增生伴髓质上皮细胞排列紊乱,符合MG病理改变。 结论:摘除Lewis大鼠双侧肾上腺可致HPA轴形态及功能异常,增加EAMG易感性,加重EAMG症状。补脾强力复方可降低EAMG大鼠Lennon评分,增加EAMG大鼠体重,降低EAMG大鼠血清AchR-Ab、Th1型细胞因子,升高血清皮质醇浓度,对EAMG模型大鼠有较好HPA轴功能调节作用。补脾强力复方可显著升高EAMG大鼠胸腺内GRmRNA及蛋白表达,有效调节神经内分泌网络,从而纠正EAMG大鼠HPA轴-免疫功能失衡状态,这可能是补脾强力复方治疗MG的重要机制之一。